Produção e padronização da expressão de fragmentos de anticorpo monoclonal humano (scFv) em Tunair Shake Flask: uso de um mAb patenteado - SERRUMAB

• Processo: 24/17537-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2026
• Área de conhecimento: Engenharias - Engenharia Biomédica - Bioengenharia
• Pesquisador responsável: Manuela Berto Pucca
• Beneficiário: Julia Lopes de Oliveira
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Assunto(s): Anticorpos monoclonais Ensaio de imunoadsorção enzimática Rendimento
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: anticorpo monoclonal | bioengenharia | Elisa | rendimento | Serrumab | Tunair Shake Flask | Bioprocessos e biotecnologia

Resumo

De acordo com dados de Ministério da Saúde, em 2022 ocorreram 183.738 acidentes com escorpiões no Brasil, resultando em 92 óbitos. O escorpião-amarelo (Tityus serrulatus), amplamente encontrado no país, é o principal responsável por casos graves. Embora exista um tratamento específico para estes casos graves, ele ainda é produzido em animais (cavalos), podendo acarretar algumas desvantagens como anafilaxia, Doença do Soro e sofrimento animal. Diante disso, ainda se faz necessário o desenvolvimento de estratégias inovadoras para neutralizar este veneno e produzir uma nova geração de antivenenos, como o uso de anticorpos monoclonais. Este projeto de iniciação científica busca a otimização da produção do fragmento de anticorpo monoclonal humano SERRUMAB em bactéria E. coli HB2151, reconhecedor da peçonha de Tityus serrulatus (escorpião-amarelo). A metodologia inclui o cultivo bacteriano comparativo em frascos de Erlenmeyer convencional e em frascos Tunair Shake, que apresentam melhor transferência de oxigênio comparado ao convencional, com acompanhamento do crescimento celular por densidade óptica e medidas de massa seca. Após avaliar indução com lactose e com IPTG, as células serão processadas para obtenção do sobrenadante, que será posteriormente purificado. O desempenho do cultivo será avaliado por meio de análises de crescimento celular, concentração do fragmentos de anticorpo purificado, e consumo de substratos (lactose e glicose) através de cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC). A análise dos resultados será realizada após calculados parâmetros cinéticos e confimação da manutenção do reconhecimento dos anticorpos pelo alvo (veneno) por ELISA. A combinação de otimização de processos com frascos Tunair e a aplicação de ferramentas de engenharia, proporcionarão uma compreensão abrangente dos fatores que influenciam a produção do SERRUMAB, contribuindo para maior escalabilidade futura, para o desenvolvimento de bioterapias direcionadas a envenenamentos por escorpiões.