Melhorando a magnetotransfecção através do enriquecimento de células FACS e sua aplicação em células de peixes

• Processo: 24/22020-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
• Data de Início da vigência: 28 de abril de 2025
• Data de Término da vigência: 27 de agosto de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Recursos Pesqueiros e Engenharia de Pesca - Aquicultura
• Pesquisador responsável: Maeli Dal Pai
• Beneficiário: Erika Stefani Perez
• Supervisor: Daniel Garcia de La Serrana Castillo
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Universitat de Barcelona (UB), Espanha
• Vinculado à bolsa: 21/13905-8 - Análise transcriptômica e funcional como estratégias para a compreensão dos padrões de crescimento muscular determinado e indeterminado de peixes, BP.DR
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Facs | Magnetotransfection | myoblasts | Seabass | wasla | waslb | Crescimento Muscular de Peixes

Resumo

O crescimento muscular em peixes ocorre por hipertrofia e hiperplasia. A hiperplasia pode ser classificada em dois tipos: mosaico e estratificada. Peixes com hiperplasia mosaico contínua ao longo da vida apresentam crescimento indeterminado, por outro lado, peixes com hiperplasia mosaico mais restrita aos primeiros dias após a eclosão têm crescimento determinado. Diversos estudos realizados ao longo dos anos contribuíram para aumentar o conhecimento sobre o crescimento muscular, no entanto, o padrão de crescimento indeterminado não é completamente compreendido. Nesse sentido, análises funcionais podem representar ferramentas eficientes para comprovar a função dos genes selecionados in silico e envolvidos no crescimento indeterminado. Esses experimentos envolvendo a manipulação da expressão gênica são relevantes no cenário da aquicultura, dada a constante demanda por aumento e melhoria da produção. Nesse contexto, o objetivo deste projeto é manipular a transcrição dos genes wasla e/ou waslb, previstos para estarem envolvidos no crescimento do músculo esquelético, no robalo europeu (Dicentrarchus labrax), uma espécie de crescimento indeterminado. Para essa proposta, utilizaremos cultura primária de células de mioblastos. Essas células serão magnetotransfectadas utilizando o protocolo preestabelecido no projeto BEPE anterior, e enriquecidas por FACS para garantir 100% de células transfectadas. Considerando a robustez da metodologia que será utilizada, espera-se que o conhecimento gerado por este projeto possa complementar, de forma muito significativa, os resultados que estão sendo obtidos no projeto de doutorado financiado pela FAPESP (2021/13905-8). Além disso, pode contribuir com o desenvolvimento de projetos de inovação de grande interesse para o setor produtivo. Pensando no aprendizado tecnológico, a magnetotransfecção e o FACS poderiam ser aplicados no Brasil utilizando outras espécies de peixes.