Exposição a produtos fumígenos e o desenvolvimento do câncer de pulmão: efeitos sobre a polarização de macrófagos

• Processo: 24/23612-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2026
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Farmácia - Análise Toxicológica
• Pesquisador responsável: Sandra Helena Poliselli Farsky
• Beneficiário: Guilherme Ponciano de Barros
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Cigarros eletrônicos Nicotina Toxicidade Toxicologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: cigarro eletrônico | imune escape | nicotina | tabaco aquecido | Toxicidade | Toxicologia

Resumo

O tabagismo é um desafio para a saúde pública devido aos efeitos nocivos dos compostos presentes na fumaça do cigarro, que são derivados da combustão do tabaco. Na tentativa de reduzir a toxicidade do cigarro, dispositivos para exposição à nicotina aquecida por via inalatória estão disponíveis no mercado, sendo que a toxicidade destes não está devidamente estabelecida. Os pulmões são suscetíveis às agressões do cigarro, manifestadas por doenças inflamatórias e tumoresO desenvolvimento de tumores sólidos são influenciados pelo sistema imune que circunda o tumor, sendo que o macrófago desempenha papel fundamental no processo. O macrófago é uma célula plástica, que muda seu fenótipo de acordo com o microambiente. Macrófagos com fenótipo pró-inflamatório (M1) exercem ações anti-tumorais e o M2 ou macrófagos associados ao tumor (TAM) são pró-tumorais. O objetivo do presente projeto é avaliar o impacto de exposições do cigarro convencional (CC), da nicotina inalada pelo vapor liberado pelo tabaco aquecido por dispositivo eletrônico (Heat tobacco products - HTP) sobre a biologia de linhagem tumoral do pulmão e sobre a polarização de macrófagos. Células A549 (tumor de pulmão) e THP-1 (monócito que se diferencia em macrófago) serão cultivadas em meio RPMI 1640 suplementado, e serão submetidas à exposição ao ar (controle), tabaco aquecido (HTP) ou CC em câmara de exposição. A câmara permite a exposição ao ar, vapor do HTP e à fumaça do CC misturada ao meio de cultura de forma intermitente, mimetizando o contato celular obtido no pulmão. A viabilidade celular será avaliada por citometria de fluxo; a proliferação das células A549 serão avaliadas por citometria de fluxo, invasão no matrigel e formação de colônias/esferoides; os fenótipo de macrófagos serão analisados por citometria de fluxo; mediadores inflamatórios, como IL-10 e TGF-¿1, serão quantificados no sobrenadante das células tumorais por ensaio imunoenzimático; marcadores de polarização (arginase-1, CD163 e CD206) serão quantificados por citometria de fluxo nos macrófagos co-cultivados com células tumorais previamente expostas ao ar, HTP ou CC. Em conjunto, os resultados contribuirão para mostrar os efeitos das exposições ao HTP ou CC sobre a célula tumoral e sobre os macrófagos na evolução do câncer de pulmão.