Bag2 na inflamação: insights da microscopia de alta resolução

• Processo: 25/00521-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2025
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Daniel Carneiro Carrettiero
• Beneficiário: Mariana Arsky Gomes
• Supervisor: Kenneth Kosik
• Instituição Sede: Centro de Ciências Naturais e Humanas (CCNH). Universidade Federal do ABC (UFABC). Ministério da Educação (Brasil). Santo André , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: University of California, Santa Barbara (UC Santa Barbara), Estados Unidos
• Vinculado à bolsa: 24/09041-6 - Bag2 e o sistema imuno-proteossomo na doença de alzheimer: da bioinformática a testes em cultura de células., BP.IC
• Assunto(s): Sistema imune Neurobiologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Confocal microscopy | immune system | interferon gamma | proteasome degradation | tauopathies | Neurobiologia

Resumo

Taupatias, incluindo a doença de Alzheimer (DA), são caracterizadas pelo acúmulo de proteína TAU hiperfosforilada intracelular, levando à desestabilização dos microtúbulos, morte neuronal e declínio cognitivo. O proteossomo desempenha um papel central em sua degradação, com estudos sugerindo uma via independente de ubiquitina, envolvendo o complexo proteico HSP70/BAG2 como uma via eficiente para a degradação de TAU. O complexo BAG2, juntamente do proteossomo 20S e da cap PA28, pode condensar formando organelas não-membranosas separadas por fase, descritas por nosso grupo como "condensados ¿¿BAG2" em 2022. A cap PA28 também é necessária para a apresentação de antígenos no complexo principal de histocompatibilidade (MHC-1, HLA-A em humanos). A sinalização pró-inflamatória, como IFN-¿ e TNF-¿, ativa a PA28 e altera o núcleo do proteossomo constitutivo, modificando suas propriedades proteolíticas e produzindo peptídeos mais imunogênicos. Isso pode indicar que os condensados ¿¿de BAG2 estão envolvidos na degradação e apresentação dos peptídeos de TAU ao sistema imunológico, embora os efeitos do IFN-¿ nos condensados ¿¿ainda sejam desconhecidos. Para entender melhor o papel da BAG2 e do IFN-¿ na degradação de proteínas e respostas imunológicas, este estudo propõe um teste de colocalização com microscopia confocal para imagens de alta resolução. Para isso, realizaremos um ensaio de imunofluorescência em culturas de células H4, incluindo um modelo de knockdown de BAG2 mediado por CRISPRi e H4 controle em resposta ao tratamento com IFN-¿, e a microscopia confocal será usada para visualizar alvos proteicos importantes envolvidos na degradação de proteínas e respostas imunológicas, como HLA-A e PA28¿ (subunidade de PA28), colocalizando com BAG2 e TAU. Espera-se que esta abordagem forneça insights valiosos sobre os mecanismos subjacentes aos mecanismos de degradação da proteína TAU na DA e outras taupatias.