Modulação pela heparina da atividade inibitória de compostos derivados de chalconas, flavonoides, complexos de paládio e aminotiazois sobre as catepsinas b e l

• Processo: 25/02023-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Pesquisador responsável: Wagner Alves de Souza Júdice
• Beneficiário: Maria Luiza Gonçalves Gallego Rosa
• Instituição Sede: Pró-Reitoria Acadêmica. Universidade de Mogi das Cruzes (UMC). Campus da Sede Mogi das Cruzes. Mogi das Cruzes , SP, Brasil
• Assunto(s): Chalconas Flavonoides Heparina Inibição enzimática
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Catesina B E L | Chalconas | flavonóides | heparina | Inibição enzimática | Enzimologia

Resumo

Este projeto de pesquisa tem como objetivo analisar a influência da heparina na inibição das catepsinas B e L por diferentes compostos, incluindo derivados de chanconas, flavonoides, complexos de paládio e aminotiazóis. Essas enzimas proteolíticas desempenham funções essenciais na degradação de proteínas e na regulação de processos celulares, sendo frequentemente associadas à progressão de diversas doenças, como o câncer. Em contextos patológicos, sua atividade pode ser desregulada, favorecendo a proliferação celular, invasão tecidual e metástase. Dessa forma, a inibição seletiva dessas enzimas surge como uma abordagem promissora para o desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas. A presença de glicosaminoglicanos (GAGs), como a heparina, pode alterar a eficácia dos inibidores, tornando essencial a compreensão detalhada dessa interação. Estudos indicam que a heparina pode modular a atividade das catepsinas, intensificando a ação da catepsina B, acelerando a inibição da catepsina L e estabilizando sua estrutura em condições alcalinas. Além disso, GAGs influenciam a ativação de catepsinas extracelulares em diversas patologias, o que reforça a necessidade de avaliar como a heparina interfere na inibição dessas enzimas por diferentes compostos. O estudo busca elucidar os mecanismos de inibição das catepsinas B e L na presença da heparina, por meio da determinação de parâmetros cinéticos (Ki, ¿Ki, kcat, Km e kcat/Km) em diferentes pHs. Além disso, pretende-se otimizar a expressão e purificação dessas enzimas. Os ensaios enzimáticos serão realizados por espectrofluorimetria, incubando as catepsinas com diferentes concentrações dos inibidores, na presença ou ausência de heparina. A análise dos dados será conduzida pelo software Grafit® 5.0.13, permitindo avaliar o impacto do pH na atividade enzimática e na eficácia dos compostos inibidores. Com este estudo, espera-se obter um entendimento detalhado sobre o papel da heparina na modulação da inibição das catepsinas B e L, contribuindo para a identificação de inibidores mais eficazes. Além disso, a análise dos parâmetros cinéticos em diferentes condições poderá fornecer subsídios para otimizar estratégias terapêuticas, beneficiando o desenvolvimento de novas abordagens no combate ao câncer.