Sistema de Cultivo de Pre-maturação: a associação de dbcAMP e sildenafil como moduladores do bloqueio meiótico para melhorar a maturação oocitária e produção embrionária.

• Processo: 25/09646-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2025
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Cláudia Lima Verde Leal
• Beneficiário: Priscila Helena dos Santos
• Supervisor: Alberto Maria Luciano
• Instituição Sede: Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos (FZEA). Universidade de São Paulo (USP). Pirassununga , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Università Degli Studi Di Milano, Sedi Lodi, Itália
• Vinculado à bolsa: 23/16602-1 - A interação das vesículas extracelulares com o complexo cumulus-oócitos durante a pré-maturação e maturação in vitro pode influenciar na competência oocitária e regulação epigenética?, BP.PD
• Assunto(s): Técnicas de maturação in vitro de oócitos Biotecnologia da reprodução
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bloqueio meiótico | maturação oocitária | Nicho folicular | regulação epigenética | Biotecnologia da Reprodução

Resumo

Embora já tenha atingido um número comercialmente relevante, a produção in vitro de embriões ainda enfrenta um desafio importante: superar a assincronia entre as maturações nuclear, citoplasmática e molecular que ocorre nos complexos cumulus-oócito (CCO) aspirados de folículos antrais pequenos e médios que estão em diferentes estágios da vesícula germinativa (VG), de maneira que proporcione uma melhor taxa de produção e qualidade dos embriões. Um melhor entendimento da foliculogênese, oogênese e comunicação cumulus-oócito por meio das junções gap (GJ) levou ao desenvolvimento de protocolos capazes de manter o oócito em bloqueio meiótico durante o cultivo in vitro, proporcionando ao oócito um tempo adicional para uma melhor sincronia da maturação oocitária. Este estudo tem como objetivo comparar três protocolos diferentes para o bloqueio meiótico temporário e reversível (pré-maturação, PMIV) em oócitos em qualquer estágio da VG ou em uma população enriquecida com oócitos no estágio de VG1. A comunicação entre as células do cúmulos e os oócitos por meio das GJ também será avaliada. Para isso, oócitos viáveis provenientes de abatedouros serão aleatoriamente submetidos ou classificados com base na morfologia (população enriquecida com oócitos no estágio de VG1) a três protocolos diferentes de PMIV: i) NPPC, FSH e esteroides; ii) análogo de cAMP (dbcAMP) em associação com inibidor de PDE5 (Sildenafil); iii) inibidor de PDE3 (Cilostamida). Em todos os protocolos, a PMIV será aplicada por 9 horas e o meio de cultivo será suplementado com 4% de polivinilpirrolidona para aumentar a viscosidade. Após a PMIV, os oócitos serão avaliados quanto a: 1) maturação nuclear, 2) comunicação intracelular, 3) atividade transcricional global do oócito, 4) transcritos das células do cúmulos, 5) taxas de produção e qualidade dos embriões. Este projeto visa adquirir novos conhecimentos sobre a resposta dos oócitos no estágio de VG1 aos diferentes protocolos de PMIV e se é possível manter as vias de comunicação do CCO, proporcionando melhorias nas condições de produção de embriões in vitro. (AU)