Efeitos da adição de diferentes concentrações de mio-inositol sobre a criopreservação espermática em garanhões

• Processo: 24/18977-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Eneiva Carla Carvalho Celeghini
• Beneficiário: Lívia Maria da Silva Paiva
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Criopreservação Equinos Membranas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Criopreservação | diluidor | equinos | membranas | mio-inositol | Andrologia equina

Resumo

A criopreservação do sêmen equino, apesar de possuir diversos benefícios, apresenta algumas limitações. Por isso, a escolha do diluente a ser utilizado na técnica é crucial para proteger os espermatozoides durante o processo. Neste sentido, o mio-inositol tem sido estudado como um componente que melhora a qualidade espermática, trazendo benefícios metabólicos e morfológicos ao espermatozoide. No entanto, ainda há lacunas para entender completamente o efeito potencial do mio-inositol. Desta forma, os objetivos deste trabalho são avaliar os efeitos do mio-inositol na criopreservação de espermatozoides equinos, buscando encontrar uma concentração ideal que proporcione os melhores benefícios sobre a qualidade espermática. Para o seguinte experimento, serão utilizados quatro garanhões que passarão por uma avaliação andrológica e análise do histórico reprodutivo. Serão colhidos quatro ejaculados de cada garanhão (n=16) utilizando vagina artificial modelo Botucatu. O sêmen será diluído (1:2) em meio à base de leite desnatado e centrifugado. Após, o sobrenadante será desprezado e o sedimento será ressuspendido com diluidor de criopreservação (Botu-Crio®), a concentração será avaliada e dividido em quatro tratamentos: CON (controle): somente diluidor, MIO15: diluidor adicionado de 15mM de mio-inositol, MIO30: diluidor adicionado de 30mM de mio-inositol, MIO45: diluidor adicionado de 45mM de mio-inositol. A diluição será realizada para concentração de 200x106 spermatozoides/mL. Posteriormente, será envasado em palhetas de 0,5 mL e submetido à criopreservação utilizando um sistema automatizado para congelação, e as palhetas serão armazenadas em botijões criogênicos. Após, duas palhetas de cada garanhão, partida e tratamento serão descongeladas, homegeneizadas e avaliadas quanto: motilidade (CASA-iSperm), morfologia (pela técnica da câmara úmida), integridade das membranas plasmática e acrossomal, potencial de membrana mitocondrial (por sondas fluorescentes). Para a análise estatística será utilizado o Programa Statistical Analyses Systems (SAS version 9.4; SAS Institute, Inc., Cary, NC, USA). Os dados obtidos serão submetidos à análise de variância (teste de Bartlett), avaliados por ANOVA e as médias dos grupos serão comparadas pelo teste de Tukey. A probabilidade de p ¿0,05 indicará diferença significativa. (AU)