Estabelecimento de um modelo de tri-cultura 3D de baixo custo para estudo de efeitoe de contaminantes emergentes nas disfunções hepáticas indutoras do fígado gordo e validação funcional da atuação da proteína ChREBP

• Processo: 25/01570-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2029
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Metabolismo e Bioenergética
• Pesquisador responsável: Karen Cristiane Martinez de Moraes
• Beneficiário: Joyce Alessandra Lima
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Rio Claro. Rio Claro , SP, Brasil
• Assunto(s): Poluentes ambientais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: ChREBP | Contaminantes ambientais | metabolismo pró-esteatótico e MAFLD | Modelo alternativo | modelo esferoide de baixo custo | Toxicologia preditiva | biologia molecular e cultura 3D; esteatose hepática; contaminantes ambientais

Resumo

As doenças hepáticas gordurosas não alcoólicas (DHGNA) são atualmente consideradas um problema de saúde pública mundial. Com etiologias diversas, essas patologias se caracterizam pelo acúmulo excessivo de gordura no fígado, que podem evoluir para condições clínicas mais graves. Em nossa sociedade, a utilização excessiva de produtos químicos, como pesticidas, tem contribuído significativamente para a contaminação ambiental, afetando mundialmente fontes de água potável e expondo animais não alvo a esses compostos, contribuindo com o aumento de casos de disfunções hepáticas e metabólicas. Assim, o desenvolvimento de metodologia alternativa ao uso de animais nas pesquisas é considerado como ferramenta valiosa na toxicologia preditiva para se avaliar os efeitos adversos de contaminantes. Considerando-se que em estudos prévios realizados em nosso laboratório, onde desenvolvemos co-cultivo 3D de células hepáticas de baixo custo para investigar ambientes pró esteatóticos, na presente propostas propomos estabelecer um modelo de tricultura 3D para servir como ferramenta biotecnológica para o estudo de disfunções metabólicas hepáticas. A tricultura 3D será exposta aos pesticidas s-metolacloro e cloratalonil e as concentrações avaliadas serão as aceitáveis por agências reguladoras. Esses pesticidas são frequentemente encontrados em águas potáveis de diferentes países. Análises celulares, moleculares e bioquímicas serão realizadas para se avaliar as rotas de sinalização adversa facilitadoras do estabelecimento de condições pró-esteatótica. Na sequência, avaliaremos o papel funcional da proteína ChREBP, importante elemento no metabolismo hepático, mas ainda sem um detalhamento sobre sua funcionalidade frente a intoxicações por pesticidas. Para as análises mecanística da ChREBP serão utilizadas ferramentas genéticas e/ ou bloqueadores químicos da atividade funcional da proteína e os esferoides ChREBP-modificados serão expostos aos pesticidas em estudo. Na sequência análises de RNA-seq elucidarão elementos da regulação fina de ChREBP em ambientes tóxicos, visando caracterização de marcadores e aplicações biotecnológicas. (AU)