Caracterização estrutural e funcional de transportadores ABC de microorganismos ESKAPE: combate à resistência antimicrobiana

• Processo: 25/11265-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2025
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2027
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
• Pesquisador responsável: Marko Juhana Hyvönen
• Beneficiário: Dur e Shahwar
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 24/10255-0 - Caracterização estrutural e funcional de transportadores ABC de microorganismos ESKAPE: combate à resistência antimicrobiana, AP.SPEC
• Assunto(s): Biologia estrutural Inibidores Química de proteínas Transportadores de cassetes de ligação de ATP
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biologia Estrutural | Crio-EM | inibidores | MsbA | química de proteínas | transportadores ABC | Biologia estrutural

Resumo

Como esta bolsa estabelece um novo laboratório no Departamento de Microbiologia, liderado pelo Prof. Hyvonen, que não está na USP o tempo todo, é importante ter alguém que lide com a gestão diária da organização do laboratório e auxilie na sua implementação. Essa pessoa também será fundamental para colocar o laboratório em funcionamento desde o início do projeto.Além disso, o titular da função apoiará os pesquisadores de pós-doutorado em seus projetos, garantindo que os recursos necessários estejam à sua disposição e que possam se concentrar totalmente em seus projetos. Isso inclui, mas não se limita a, a produção de placas e meios bacterianos, géis de SDS-PAGE para análise de proteínas, o cultivo de bactérias em experimentos de expressão em larga escala, a realização de clonagem molecular de construções de expressão e a execução de etapas básicas na purificação de proteínas.O titular da função também terá um papel no desenvolvimento e execução de ensaios de resistência a antibióticos baseados em células para avaliar a especificidade das proteínas MsbA de diferentes organismos ESKAPE. O titular da função terá como principal responsabilidade manter o laboratório em funcionamento, garantir o bom funcionamento dos equipamentos e solicitar manutenção e reparos conforme necessário. Eles também realizarão tarefas regulares de manutenção preventiva nos equipamentos para minimizar quebras. Garantirão também que o laboratório esteja totalmente abastecido com meios, placas microbianas, antibióticos e outras soluções estoque, géis SDS-Page e outros reagentes necessários. Também farão a manutenção dos grupos de cepas bacterianas e plasmídeos, preparando células competentes e novos estoques de lasmídeos, conforme necessário.Eles auxiliarão pesquisadores de pós-doutorado em seu trabalho, especialmente com tarefas menos complexas de cultivo e coleta de bactérias, execução de géis e realização de experimentos básicos de biologia molecular e diversas cromatografias.Um dos objetivos desta proposta é desenvolver ensaios utilizando E. coli como hospedeiro para avaliar a resistência a medicamentos provocada pelas proteínas MsbA do micróbio ESKAPE. Com a orientação do Diretor de Pesquisa, o titular do cargo gerará sistemas de expressão ajustáveis ¿¿adequados para todas as proteínas MsbA, avaliará sua função neste sistema e usará este ensaio para quantificar a resistência que as proteínas MsbA podem fornecer às bactérias em resposta ao desafio antimicrobiano. (AU)