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Efeitos da superexpressão de eEF1A1 (fator de alongamento eucariótico 1A1) sobre a qualidade e competência do desenvolvimento de embriões bovinos produzidos in vitro no estágio pré-implantacional

Processo: 25/20966-4
Modalidade de apoio:Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
Data de Início da vigência: 01 de abril de 2026
Data de Término da vigência: 31 de março de 2027
Área de conhecimento:Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
Pesquisador responsável:Mateus José Sudano
Beneficiário:Rogério Amorim dos Reis
Supervisor: Fernando Henrique Biase
Instituição Sede: Centro de Ciências Biológicas e da Saúde (CCBS). Universidade Federal de São Carlos (UFSCAR). São Carlos , SP, Brasil
Instituição Anfitriã: Virginia Polytechnic Institute and State University, Estados Unidos  
Vinculado à bolsa:23/15187-0 - Papel do gene eEF1A1 (fator de alongamento eucariótico 1A1) na competência do desenvolvimento e qualidade de embriões bovinos produzidos in vitro, BP.DR
Assunto(s):Embriogênese   Expressão gênica   Fertilização in vitro
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Desenvolvimento embrionário | expressão gênica | fertilização in vitro | Expressão gênica e desenvolvimento embrionário.

Resumo

O fator de alongamento da tradução eucariótico 1A1 (eEF1A1), pertencente à família de proteínas solúveis chamadas fatores de alongamento eucariótico (eEFs), atua catalisando as primeira etapas do alongamento da síntese proteica no desenvolvimento embrionário inicial. Apesar de ser importante para o desenvolvimento embrionário inicial, alguns estudos demonstraram uma relação entre a superexpressão deste gene com a baixa competência de desenvolvimento embrionário. Diante isso, objetiva-se avaliar os impactos da superexpressão de eEF1A1 sobre a qualidade e capacidade de desenvolvimento de embriões bovinos produzidos in vitro no estágio pré-implantacional. Para tanto, será conduzido um ensaio experimental constituído por 03 tratamentos: controle, controle de técnica e superexpressão de eEF1A1, a qual será realizada por meio da técnica de eletroporação. Os tratamentos obedecerão ao Delineamento Inteiramente Casualizado - DIC. O desenvolvimento embrionário será monitorado até o dia 8,5 (dia 0 = dia da fecundação) e serão avaliadas as variáveis taxa de clivagem (D2), taxa de produção de blastocistos (D7,5-D8,5) e taxa de eclosão (D7,5-D8,5). Além disso, serão realizados ensaios analíticos para avaliar a imunolocalização de proteínas (CDX2 e eEF1A1), a quantificação de níveis de transcritos para eEF1A1 e o nível de células em apoptose (TUNEL). Os dados obtidos relacionados à produção embrionária, apoptose e avaliação dos nível de transcritos serão avaliados por ANOVA ou regressão logística, considerando os tratamentos como efeitos fixos e as repetições como efeitos aleatórios, utilizando o software SAS. Caso necessário, os dados serão contrastados utilizando a probabilidade de diferença individual (PDIFF). Será adotado 5% como nível de significância.

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