Efeitos dos herbicidas Glifosato e Terbutilazina na carcinogênese hepática: integrando toxicogenômica e avaliação de risco

• Processo: 25/05637-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2026
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2029
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Anatomia Patológica e Patologia Clínica
• Pesquisador responsável: Guilherme Ribeiro Romualdo
• Beneficiário: Luana Riechelmann Casarin
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FMB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Glifosato Herbicidas Patologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: carcinogênese hepática | glifosato | Herbicidas | New Approach Methods | terbutilazina | Patologia

Resumo

O glifosato (GLP) é um dos ingredientes ativos mais aplicados globalmente, enquanto a Terbutilazina (TBA) apresenta uso crescente. Em face da aplicação disseminada, resíduos desses herbicidas são encontrados no solo, ar, água e em alimentos, o que pode culminar na exposição humana. Apesar das evidências indicarem o fígado como um órgão alvo da toxicidade desses herbicidas, estudos específicos sobre sua influência na carcinogênese hepática são escassos. Além disso, possíveis interações entre GLP e TBA, que podem resultar em "cocktail effects", são pouco compreendidas e geralmente negligenciadas. Assim, este estudo objetiva (A) avaliar os efeitos das formulações de GLP e/ou de TBA sobre a carcinogênese hepática em ratos, aplicando doses dentro dos limites toxicológicos vigentes; e (B) investigar os efeitos dessas substâncias em hepatócitos (in vitro). Para isso, ratos machos com cinco semanas de idade receberão duas doses semanais do carcinógeno Dietilnitrosamina [100 mg/kg por peso corpóreo (p.c.), via intraperitoneal] ou veículo (solução salina 0,9%) durante três semanas. Na 8ª semana, os ratos receberão via intragástrica, 5 vezes por semana (A) uma formulação de GLP [Roundup Original DI (57,7% m/v sal de di-amônio de GLP), nas doses de 5, 0,5 ou 0,005 mg/kg p.c. de GLP]; ou (B) uma formulação de TBA [Timber 500 SC (50,0% m/v de terbutilazina), de 4, 0,4 ou 0,004 mg/kg p.c. de TBA]; ou (C) a mistura de ambos nas doses baixas (0,005 + 0,004 mg/kg p.c.), intermediárias (0,5 + 0,4 mg/kg p.c.) ou maiores (5 + 4 mg/kg p.c.) durante uma semana e eutanasiados na 9ª semana (endpoint #1) (n=6/grupo). Outros animais receberão os herbicidas por mais 16 semanas e serão eutanasiados na 32ª semana (endpoint #2) (n=12/grupo). No endpoint #1 serão coletadas amostras de fígado [imunoistoquímica (Ki-67 e H2AX), quantificação de MDA e FRAP e análise do transcriptoma], amostras de sangue (ensaio do cometa), medula óssea (teste do micronúcleo) e soro (ALT, AST e array de citocinas). No endpoint #2 o fígado será coletado para imunoistoquímica (Ki-67 e GST-P, marcador de lesão pré-neoplásica) e para análise do transcriptoma. Para o estudo in vitro, linhagens celulares normais do fígado (THLE-2), em monocamadas/esferoides, serão expostas as formulações de GLP, TBA ou sua mistura (com concentrações a definir) por até 72 horas. Serão avaliadas viabilidade celular, ciclo celular, genotoxicidade e transcriptoma. Para os estudos in vivo (endpoint #1) e in vitro, serão estabelecidos "points of departure" transcriptômicos (tPoD), que serão comparados e associados aos desfechos de longo prazo (endpoint #2) para futura aplicação na avaliação de risco como "New Approach Methods". Os resultados deste estudo poderão fornecer evidências sobre os efeitos sinérgicos da exposição combinada ao GLP e TBA na carcinogênese hepática, incentivando a reavaliação dos padrões atuais de segurança para exposição à herbicidas. Além disso, a validação de New Approach Methods poderá contribuir para aprimorar a avaliação de risco de herbicidas, fornecendo subsídios para a revisão de diretrizes regulatórias. (AU)