Caracterização funcional da proteína ALKBH de Leishmania infantum e seu papel na resistência ao antimonial

• Processo: 26/21487-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2026
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2027
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia - Protozoologia de Parasitos
• Pesquisador responsável: Nilmar Silvio Moretti
• Beneficiário: Maria Eduarda dos Santos da Silva
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 22/03075-0 - Desvendando os mecanismos regulatórios envolvidos na relação parasito hospedeiro da Leishmania: foco nas alterações pós-transcricionais e pós-traducionais, AP.PNGP.PI
• Assunto(s): Leishmania infantum Resistência a medicamentos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Alkbh | antimonial | leishmania infantum | Modificação de RNA | m6A | Resistência a drogas | Biologia Molecular de Leishmania

Resumo

A leishmaniose visceral, causada por Leishmania infantum, é uma doença tropical negligenciada de alta mortalidade se não tratada. O tratamento de primeira escolha no Brasil utiliza compostos à base de antimônio pentavalente (SbV), como o antimoniato de meglumina (Glucantime). Contudo, o surgimento de parasitos resistentes ao antimonial representa um grave obstáculo terapêutico, cujos mecanismos moleculares ainda não estão completamente elucidados. Evidências crescentes apontam que mecanismos pós-transcricionais, especialmente modificações químicas de RNA como a N6-metiladenosina (m6A), desempenham papel relevante na regulação da expressão gênica em Leishmania e podem contribuir para o desenvolvimento de resistência a fármacos. Dados preliminares do nosso grupo demonstram que os níveis globais de m6A diminuem progressivamente durante a aquisição de resistência ao antimônio em L. infantum, sugerindo que enzimas demetilases de m6A, como as proteínas da família ALKBH ("apagadores"), podem ser determinantes nesse processo. O presente projeto de iniciação científica tem como objetivo realizar a caracterização funcional de um ortólogo de proteína ALKBH identificado em L. infantum, investigando seu papel na modulação dos níveis de m6A e na resistência ao antimonial. Para isso, serão geradas linhagens nocautes do parasita (KO) via CRISPR/Cas9, linhagens com marcação fluorescente para determinação da localização subcelular da proteína, e realizados ensaios de sensibilidade ao antimonial e quantificação de m6A por dot blot e Immuno Northern Blot. Os resultados esperados contribuirão para a compreensão do papel das modificações epitranscriptômicas na resistência a fármacos em Leishmania. (AU)