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Identificação e caracterização de proteínas que interagem com THI1 de Arabidopsis thaliana via sistema duplo-híbrido de levedura

Processo: 04/09520-8
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Vigência (Início): 01 de dezembro de 2004
Vigência (Término): 30 de novembro de 2007
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Genética - Genética Vegetal
Pesquisador responsável:Márcio de Castro Silva Filho
Beneficiário:Christine Petrina Stock
Instituição-sede: Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz (ESALQ). Universidade de São Paulo (USP). Piracicaba , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:03/13255-5 - Genes de reparo de DNA: análise funcional e evolução, AP.TEM

Resumo

A tiamina (vitamina B1) é um nutriente essencial requerido por todas as células. Em alguns organismos sua biossíntese ocorre por meio da condensação de pirimidina e tiazol. O gene thi1 de Arabidopsis thaliana é um gene de cópia única que codifica uma proteína de 36 kDa envolvida na biossíntese do anel de tiazol. Interessantemente, o cDNA de thi1 foi originalmente isolado pela sua propriedade de complementar parcialmente uma bactéria com deficiência nas vias de reparo de DNA (Machado et al., 1996). Os mesmos autores também demonstraram que THI4, o ortólogo de THI1 em leveduras, está envolvido na proteção do DNA mitocôndrial (Machado et al., 1997). THI1 pode, portanto, ser considerada uma proteína bifuncional que age tanto no reparo do DNA como na biossíntese de tiamina. O objetivo deste trabalho é identificar proteínas envolvidas com a função de THI1 na biossíntese de tiamina e/ou seu papel na estabilidade do DNA organelar. Além disso, tentar identificar proteínas relacionadas à sua dupla localização subcelular por meio de uma investigação extensiva, usando o sistema duplo-híbrido de leveduras. (AU)