Identificação e caracterização de proteínas que interagem com THI1 de Arabidopsis thaliana via sistema duplo-híbrido de levedura

• Processo: 04/09520-8
• Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Vigência (Início): 01 de dezembro de 2004
• Vigência (Término): 30 de novembro de 2007
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Vegetal
• Pesquisador responsável: Márcio de Castro Silva Filho
• Beneficiário: Christine Petrina Stock
• Instituição-sede: Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz (ESALQ). Universidade de São Paulo (USP). Piracicaba , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 03/13255-5 - Genes de reparo de DNA: análise funcional e evolução, AP.TEM

Resumo

A tiamina (vitamina B1) é um nutriente essencial requerido por todas as células. Em alguns organismos sua biossíntese ocorre por meio da condensação de pirimidina e tiazol. O gene thi1 de Arabidopsis thaliana é um gene de cópia única que codifica uma proteína de 36 kDa envolvida na biossíntese do anel de tiazol. Interessantemente, o cDNA de thi1 foi originalmente isolado pela sua propriedade de complementar parcialmente uma bactéria com deficiência nas vias de reparo de DNA (Machado et al., 1996). Os mesmos autores também demonstraram que THI4, o ortólogo de THI1 em leveduras, está envolvido na proteção do DNA mitocôndrial (Machado et al., 1997). THI1 pode, portanto, ser considerada uma proteína bifuncional que age tanto no reparo do DNA como na biossíntese de tiamina. O objetivo deste trabalho é identificar proteínas envolvidas com a função de THI1 na biossíntese de tiamina e/ou seu papel na estabilidade do DNA organelar. Além disso, tentar identificar proteínas relacionadas à sua dupla localização subcelular por meio de uma investigação extensiva, usando o sistema duplo-híbrido de leveduras. (AU)