Uso de bibliotecas de cDNA subtraídas acoplado a microarranjos de cDNA para a análise das alterações do programa transcricional promovido por glicocorticoides na reversão do fenótipo tumoral-normal em células ST1 de glioma de rato

• Processo: 00/09759-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2000
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Mari Cleide Sogayar
• Beneficiário: Cleber Giovane Vedoy
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 99/07390-0 - Cooperation for Analysis of Gene Expression - CAGE, AP.TEM
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Dna Microarrays | Expressao Genica Diferencial | Glicocorticoides | Hibridizacao Subtrativa

Resumo

Um número pequeno de genes regulados por glicocorticoides é conhecido até o momento, particularmente, daqueles envolvidos no controle da proliferação celular. A velocidade na identificação de genes diferencialmente expressos tem sido grandemente aumentada através da utilização de métodos como a subtração de cDNAs, SAGE, e mais recentemente, os microarranjos de cDNA. Esta última tem sido uma ferramenta valiosa na análise funcional de genomas através da rápida identificação da expressão alterada de genes conhecidos, genes novos ou de marcadores tumorais. Nós temos identificado diversos genes regulados por GCs utilizando o modelo celular de glioma de rato ST1, que reverte de tumoral para normal sob tratamento com glicocorticoides, através da construção de bibliotecas de cDNA subtraídas e normalizadas. O uso destas bibliotecas elimina o predomínio de mRNAs abundantes entre os "probes" a serem aplicados nos microarranjos de cDNA, o que por sua vez possibilita a análise de genes com menores níveis de expressão. Isso tem facilitado grandemente a identificação de marcadores tumorais. A utilização da metodologia de microarranjos de cDNA em bibliotecas de cDNA subtraídas e normalizadas de células ST1, permitiria-nos a rápida identificação de outros possíveis supressores de tumor que ainda não foram revelados em nossa análise aumentando a lista de bons candidatos a terapia gênica de gliomas e glioblastomas. (AU)