Papel da trans-sialidase do Trypanosoma cruzi no escape do vacúolo parasitóforo

• Processo: 07/50944-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2007
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2008
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
• Pesquisador responsável: Sergio Schenkman
• Beneficiário: Vanessa Cristina Coimbra
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Escape Do Fagolissoma | Infeccao Intracelular | Trans-Sialidase | Trypanosoma Cruzi

Resumo

A invasão de células de mamíferos pelo T. cruzi coincide com a formação de um vacúolo parasitóforo (VP), seguido do escape, e multiplicação do parasita para o citossol da célula hospedeira. Em nosso laboratório foi verificado que quando metacíclicos são transfectadas com o gene da trans-sialidase (TS) estes passam a escapar tão rápido do VP quanto as formas tripomastigotas sem, no entanto, alterar sua capacidade de invasão (Rubin-de-Celis et al., 2006). Esta observação sugere que a TS esteja envolvida com o aumento na velocidade de escape. A TS catalisa a transferência de ácidos siálicos de glicoconjugados do hospedeiro para moléculas na superfície do parasita. Não há informações sobre o mecanismo que propicia o aumento do escape e se é o escape que promove a diferenciação. Também não se sabe o que pode acontecer se as formas amastigotas passarem a expressar a TS quanto a sua multiplicação, diferenciação em tripomastigotas, saída da célula hospedeira e estabelecimento de nova infecção. A proposta deste trabalho é examinar a influência da TS nesses processos. Procuraremos obter formas do T. cruzi expressando o mesmo gene de TS integrado no genoma e sob o controle do promotor de RNA polimerase T7 e regulado pelo repressor de tetraciclina. Com este sistema poderemos entender, com maiores detalhes, o papel da TS no desenvolvimento intracelular do T. cruzi utilizando mutantes desta enzima sem atividade de trans-glicosilação mas com a atividade de ligação ao substrato, ou mutantes que somente fazem a reação de hidrólise. (AU)