Investigação do comportamento de células de linhagem odontoblástica (MDPC-23) cultivadas em uma matriz 3D

• Processo: 09/08837-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2009
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2011
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Endodontia
• Pesquisador responsável: Marcelo Rocha Marques
• Beneficiário: Marilia Avi de Mesquita
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Piracicaba (FOP). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Piracicaba , SP, Brasil
• Assunto(s): Expressão gênica Odontoblastos Impressão tridimensional Proliferação Reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa (RT-PCR) In vivo
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cultivo celular tridimensional | Odontoblastos | Biologia pulpar

Resumo

Tem sido demonstrado que o cultivo de células em matriz de 3 dimensões (3D), quando comparada a cultivo em 2D, pode mimetizar melhor in vitro as condições de interação célula/célula e célula/matriz extracelular que comumente podem ser observadas in vivo. Tal condição tridimensional de cultivo pode favorecer parâmetros que caracterizam fenotipicamente determinado tipo celular. Embora existam trabalhos sobre a polpa dental em cultivo 3D, pouco se sabe sobre os o comportamento de odontoblastos nestas condições. Esse projeto irá avaliar o efeito do cultivo de células odontoblásticas da linhagem MDPC-23, encapsuladas em um hidrogel (PuraMatrix), na proliferação e viabilidade celulares; expressão gênica de proteínas da matriz dentinária e atividade da fosfatase alcalina. Células imortalizadas da linhagem odontoblástica MDPC-23 serão cultivadas encapsuladas e sobre um hidrogel (PuraMatrix). Como controle, células serão cultivas sobre placas (ou poços) plásticas comuns para cultivo celular. Após 1, 3, 5 e 7 dias serão avaliadas: proliferação e viabilidade celulares, que será feita por meio do teste MTT; a atividade da fosfatase alcalina, que será analisada utilizando-se de um kit específico (Labteste); e a expressão gênica, que será feita por meio de RT-PCR em tempo real para os seguintes genes: colágeno 1 (Col1a1), proteína de matriz da dentina 1 (Dmp1), sialofosfoproteína da dentina (Dspp) e para fosfatase alcalina (Alpl). Os dados obtidos serão analisados estatisticamente por Kruskal-Wallis complementado pelo teste de Mann-Whitney.(AU)