Caracterização sorológica e molecular da infecção viral em cavalos causada pelos herpesvírus equinos tipos 1 (EHV-1) e 4 (EHV-4)

• Processo: 07/58862-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2008
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2011
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Medicina Veterinária Preventiva
• Pesquisador responsável: Leonardo José Richtzenhain
• Beneficiário: Enio Mori
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Diversidade Molecular | Herpesvirus Equino Tipo 1 | Pcr | Sequenciamento Dna Viral

Resumo

Os EHV-1 e EHV-4 são considerados os principais agentes infecciosos para a espécie. Dentre as doenças causadas por esses agentes destacam-se a rinopneumonite, o abortamento a vírus, a mortalidade perinatal e a mieloencefalopatia. Sabe-se que o EHV-1 encontra-se amplamente disseminado na população eqüina em todo o território nacional; entretanto, a ocorrência da infecção pelo EHV-4 foi insuficientemente investigada. Apesar de existirem diversos isolados brasileiros do EHV-1, pouco se conhece a respeito da patogenicidade e da diversidade molecular desses vírus. Desta forma, pretende-se caracterizar molecularmente os isolados do EHV-1 por meio do seqüenciamento parcial de nucleotídeos da ORF 30 e da ORF 68, que podem apresentar mutações relacionadas com a neuropatogenicidade e a distribuição geográfica das estirpes virais, respectivamente. Com o intuito de diferenciar os vírus latentes da infecção ativa e de identificar o comportamento de estirpes neuropatogênicas do EHV-1, a carga viral será quantificada por meio da PCR em tempo real quantitativo (qPCR) e a intensidade de expressão do RNA mensageiro da região genômica gB será determinada pela PCR em tempo real precedida de transcrição reversa (RT-qPCR). Para tanto, serão analisadas amostras de conveniência obtidas de cavalos assintomáticos comunicantes e daqueles com manifestações clínicas sugestivas de infecção herpética. A partir das amostras de soro de cavalos naturalmente infectados, anticorpos séricos anti-EHV-1 e anti-EHV-4 serão quantificados por meio da prova gG ELISA indireto com o objetivo de diferenciar os tipos virais, incluindo-se estudos comparativos para a avaliação da concordância entre as provas de ELISA indireto e de soroneutralização viral. (AU)