Clonagem, expressão e caracterização cinética da proteína tirosina fosfatase de soja (Glycine max)

• Processo: 00/07236-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2000
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2002
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Pesquisador responsável: Hiroshi Aoyama
• Beneficiário: Luciana de Campos Leite Medeiros
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): DNA complementar Proteínas tirosina fosfatases Soja Glycine max Cinética Clonagem Expressão de proteínas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cinetica | Clonagem | Expressao | Proteina Tirosina-Fosfatase | Purificacao

Resumo

O projeto de pesquisa tem como objetivo expressar o CDNA da proteína tirosina fosfatase de soja (Glycine max) em E. coli. Uma vez conhecida a seqüência de nucleotídeos do MRNA que codifica esta proteína, serão sintetizados oligonucleotídeos degenerados os quais serão utilizados para o reconhecimento do MRNA específico em alguns tecidos da planta, e para amplificação do CDNA através de PCR. Os fragmentos obtidos por PCR serão clonados em vetor de expressão. Com a proteína tirosina fosfatase recombinante serão realizados estudos cinéticos, como por exemplo, condições ótimas de reação, especificidade enzimática, parâmetros cinéticos, etc. (AU)