| Processo: |
15/03329-9
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| Linha de fomento: | Bolsas no Brasil - Doutorado Direto |
| Vigência (Início): |
01 de outubro de 2015
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| Vigência (Término): |
25 de março de 2018
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| Área do conhecimento: | Ciências Biológicas
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Bioquímica
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Biologia Molecular |
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| Pesquisador responsável: | Felipe Santiago Chambergo Alcalde |
| Beneficiário: | Gabriel Stephani de Oliveira |
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| Instituição-sede: |
Escola de Artes, Ciências e Humanidades (EACH). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
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| Bolsa(s) vinculada(s): | 16/12859-4 - Identificação de substratos e inibidores de epóxido hidrolases de Trichoderma reesei,
BE.EP.DD
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| Assunto(s): | Enzimologia
Epóxido hidrolases
Clonagem
Trichoderma reesei
Cromatografia líquida de alta eficiência |
Resumo
As enzimas são importantes moléculas biológicas amplamente estudadas e utilizadas em atividades econômicas. Enzimas epóxido hidrolases catalisam a hidrólise de epóxidos a seus correspondentes dióis, e diversos estudos demonstram seu grande potencial para aplicação biotecnológica em processos industriais e de biorremediação. Neste projeto são descritas as etapas já concluídas no período de mestrado, como a identificação e caracterização de dois genes codificadores de enzimas epóxido hidrolases (TrEH 1 e TrEH 2) do fungo Trichoderma reesei, bem como a clonagem no vetor de expressão pProEX-HTa (Life Technologies, USA), expressão em Escherichia coli BL 21, e purificação da enzima epóxido hidrolase 2 (TrEH 2). Os ensaios preliminares desenvolvidos demonstram atividade enzimática e enantioseletividade sobre o substrato óxido de estireno (epóxido). Para a continuidade do projeto (doutorado direto) propõe-se a expressão e purificação da proteína recombinante TrEH 1 e com as duas enzimas (TrEH 1 e TrEH2), pretende-se realizar a caracterização cinético-enzimática, testes de determinação da enantioseletividade por cromatografia líquida de alta performance (HPLC) e predições estruturais. Esta proposta é pioneira na descrição e caracterização das enzimas epóxido hidrolases do fungo Trichoderma reesei. (AU)
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Publicações científicas
(5)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
DE OLIVEIRA, GABRIEL S.;
ADRIANI, PATRICIA P.;
RIBEIRO, JOAO AUGUSTO;
MORISSEAU, CHRISTOPHE;
HAMMOCK, BRUCE D.;
DIAS, MARCIO VINICIUS B.;
CHAMBERGO, FELIPE S.
The molecular structure of an epoxide hydrolase from Trichoderma reesei in complex with urea or amide-based inhibitors.
International Journal of Biological Macromolecules,
v. 129,
p. 653-658,
MAY 15 2019.
Citações Web of Science: 0.
DE OLIVEIRA, GABRIEL S.;
ADRIANI, PATRICIA P.;
WU, HAO;
MORISSEAU, CHRISTOPHE;
HAMMOCK, BRUCE D.;
CHAMBERGO, FELIPE S.
Substrate and inhibitor selectivity, and biological activity of an epoxide hydrolase from Trichoderma reesei.
MOLECULAR BIOLOGY REPORTS,
v. 46,
n. 1,
p. 371-379,
FEB 2019.
Citações Web of Science: 0.