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Efeitos da poluição aquática sobre a estrutura branquial em girinos de rã-touro, Rana catesbeiana

Processo: 99/00052-1
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Data de Início da vigência: 01 de abril de 1999
Data de Término da vigência: 31 de março de 2001
Área de conhecimento:Ciências Biológicas - Ecologia
Pesquisador responsável:Paulo Hilário Nascimento Saldiva
Beneficiário:Monica Alonso
Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Poluição da água   Sulfato de cobre   Fungicidas   Brânquias   Rana catesbeiana
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Girino | Histoquimica | Muco Branquial | Poluicao Aquatica | Sulfato De Cobre

Resumo

O presente estudo pretende analisar os efeitos do sulfato de cobre, substância amplamente utilizada como fungicida na Agricultura, sobre a estrutura branquial em girinos de rã-touro, Rema catesbeiana. Esta análise será feita através da morfometria da brânquia e da histoquímica e reologia do muco branquial. O experimento será conduzido no Biotério de Manutenção e as análises dos resultados serão realizadas junto ao Laboratório de Poluição Atmosférica Experimental, ambos pertencentes ao Departamento de Patologia da Faculdade de Medicina da USP. Os girinos serão obtidos do Ranário Experimental do Instituto de Pesca e serão mantidos em aquários de 3 litros, com densidade máxima de 2,6 girinos por litro. Serão utilizados dois fungicidas cujo princípio ativo é o sulfato de cobre. A dose será de 0,2mg por litro e os efeitos nas brânquias serão estudados após 1, 2 e 4 semanas de exposição. As brânquias serão fixadas por 24h em líquido de McDowell; após rotina de processamento e inclusão em parafina, cortes sagitais de 5µm de espessura serão corados por Alcian Blue e ácido periódico de Schiff. Para a morfometria da brânquia serão medidos o comprimento do arco, número de filamentos por arco e altura e largura máximas dos filamentos na região central do arco. A análise quantitativa e qualitativa do muco branquial será realizada com auxílio da técnica de coloração Alcian Bluelkcido periódico de Schiff. As substâncias mucosas serão caracterizadas como vermelho ou azul, de acordo com a coloração histoquímica da glicoproteína. A quantidade de muco recobrindo a superfície epitelial nos filamentos branquiais será determinada pela técnica de contagem de pontos. Duas propriedades reológicas do muco branquial serão determinadas por microrreometria magnética: G* (deformabilidade total) e tan δ (proporção da deformação de viscoso a elástico), cada uma medida em 10 rads/s. Os valores múltiplos obtidos para cada variável morfométrica em cada animal serão expressos em média (±SD) e avaliados pelo Teste de Mann-Whitney, com nível de significância fixado em 5%. Pretende-se avaliar se alterações quantitativas e qualitativas na secreção de muco pelo epitélio respiratório em girinos de rã-touro podem ser utilizadas como indicadores de processos patológicos induzidos pelo cobre e se elas representam uma resposta filogenética estereotipada do aparelho respiratório de vertebrados expostos a um agente tóxico. (AU)

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