Oxidase alternativa de crinipellis perniciosa: analise da expressao e estudos de atividade.

• Processo: 04/05228-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2004
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2005
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Gonçalo Amarante Guimarães Pereira
• Beneficiário: Daniela Paula de Toledo Thomazella
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Expressão gênica Estrobilurina Oxidase alternativa
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Acido Salicihidroxamico (Sham) | Cassoura De Bruxa | Crinipellis Perniciosa | Estrobilurina | Expressao Genica | Oxidase Alternativa

Resumo

Crinipellis perniciosa é o fungo causador da doença vassoura de bruxa no cacaueiro (Theobroma cacao) e tem prejudicado drasticamente a produção de cacau em países da América do Sul. A doença foi um dos fatores que fizeram o Brasil, em poucos anos, passar de exportador a importador de cacau, sendo o maior problema fitopatológico da Bahia, maior região produtora. Diversos fungicidas têm sido testados para controlar a doença, entre eles drogas à base de inibidores da cadeia respiratória principal. Entretanto, C. perniciosa tem se mostrado resistente aos mesmos e o controle da doença não tem sido efetivo através desta técnica. A inspeção do genoma do fungo levou à identificação de um gene putativo que codifica para uma oxidase alternativa (AOX), cujo funcionamento poderia explicar a resistência do fungo. Oxidases alternativas transferem elétrons diretamente da ubiquinona para o oxigênio, dissipando a energia do transporte de elétrons na forma de calor e produzindo uma menor quantidade de ATP. Impedem também o acúmulo de espécies reativas de oxigênio, sendo este acúmulo, ao lado da menor produção de ATP, fatores responsáveis pela toxicidade das drogas à base de inibidores da via principal. Considerando estes pontos, pretende-se analisar o gene putativo Aox de C. perniciosa e a atividade da provável proteína. Para isso, o gene e a região codante da AOX serão seqüenciados, a expressão gênica será avaliada em experimentos de northern blot e o padrão de consumo de oxigênio será analisado na presença de inibidores de diversas etapas da cadeia respiratória. Deste modo, o projeto visa a ampliação dos conhecimentos das formas de resistência do patógeno, servindo de base para o desenvolvimento de estratégias bioquímicas para o controle da vassoura-de-bruxa. (AU)