Utilização da RT-PCR em tempo real para a análise da expressão gênica dos fatores de regulação miogênica MyoD e miogenina na musculatura estriada do pintado (Pseudoplatystoma corruscans)

• Processo: 08/54490-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2008
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2009
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Recursos Pesqueiros e Engenharia de Pesca - Aquicultura
• Pesquisador responsável: Maeli Dal Pai
• Beneficiário: Juliana Giusti
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Peixes Pintado Pseudoplatystoma corruscans Músculo estriado Miogenina Fatores de regulação miogênica Expressão gênica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Expressao Genica | Miogenina | Musculo Estriado Esqueletico | Myod | Peixes | Pseudoplatystoma Corruscans

Resumo

O pintado (Pseudopiatystoma corruscans) é encontrado nas principais bacias hidrográficas sul-americanas, possui grande importância econômica, sendo considerado um dos peixes de água doce de grande valor comercial. O seu grande potencial produtivo e a qualidade da sua carne despertam grande interesse comercial para a aquicultura. Nos peixes, o tecido muscular estriado esquelético forma a maior parte da massa corporal, sendo distribuído nos compartimentos: vermelho (superficial), intermediário e branco (profundo) que constitui cerca de 40 a 75% do peso total do animal. O crescimento do tecido muscular ocorre por hipertrofia e/ou hiperplasia a partir dos mioblastos indiferenciados ou células miossatélites. Esses processos são regulados pela expressão dos fatores de regulação miogênica (MRFs) cuja expressão é variável entre as espécies, fases do crescimento e tipos de músculo. A expressão diferencial dos MRFs nessas fases pode controlar os mecanismos de crescimento e o desenvolvimento muscular. O objetivo deste trabalho é avaliar a morfologia e a expressão gênica dos MRFs miogenina e MyoD, no tecido muscular esquelético vermelho e branco do pintado durante a fase juvenil. Os peixes (ri=10) serão anestesiados, sacrificados e determinados o peso (g) e comprimento total (cm). Fragmentos musculares dos compartimentos vermelho (lateral) e branco (dorsal) de cada exemplar serão coletados e congelados em nitrogênio líquido. Cortes histológicos (10 pm), obtidos em criostato, serão submetidos à coloração HE para a avaliação da morfologia das fibras musculares. Será calculado o menor diâmetro de 100 fibras musculares de cada tipo em cada animal, para avaliar o grau de crescimento hipertrófico e hiperplásico das mesmas. A avaliação da expressão dos Fatores de Regulação Miogênica MyoD e Miogenina será realizada por Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real após Transcrição Reversa (qRT-PCR). Para a análise estatística dos resultados, prevemos o teste t de Student Uma diferença de 5% (p<0.05) será considerada estatisticamente significativa. (AU)