Padronização do uso corantes para conjugação à anticorpos monoclonais: novas ferramentas na detecção de Escherichia coli diarreiogênica

• Processo: 08/10670-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2009
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2010
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Roxane Maria Fontes Piazza
• Beneficiário: Milton César de Almeida Pereira
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Fatores de virulência Anticorpos monoclonais Testes imunológicos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: anticorpos monoclonais | Escherichia coli diarreiogênica | Fatores de virulência | isotiocianato de fluoresceína | tintas coloidais | Imunodiagnóstico

Resumo

Infecções diarréicas agudas ainda são apontadas como significante causa de morbidade e mortalidade. Anualmente são estimadas aproximadamente de 2 a 2,5 milhões de mortes associadas à diarréia em crianças abaixo de cinco anos. Dentre os patógenos causadores de diarréia as Escherichia coli diarreiogênicas são responsáveis por 30 a 40% dos episódios de diarréia aguda nos países em desenvolvimento. Neste contexto, o diagnóstico é uma importante ferramenta para minimizar e controlar ocorrências. Todavia, enquanto que V. cholerae, Shigella spp e rotavírus podem ser detectados por ensaios padrões, a detecção de E. coli é mais difícil, aliado ao fato de que, erroneamente, este patógeno não costuma ser considerado como principal causa de diarréia em crianças. Dentre as E. coli diarreiogênicas, as categorias de relevada importância epidemiológica são: E. coli enterotoxigênica (ETEC) que apresenta como principais fatores de virulência a produção das toxinas termo-estável (ST) e termo-lábil (LT), E. coli enteropatogênica (EPEC) possui intimina e Escherichia coli produtora da toxina de Shiga (STEC) produz as potentes citotoxinas de Shiga (Stx1 e/ou Stx2). Anticorpos são ferramentas importantes na detecção de diversos patógenos, anticorpos monoclonais apresentam alta especificidade e soros imunes obtidos de ratos ou coelhos apresentam alta sensibilidade. No entanto a perspectiva de aplicar metodologias adequadas a realidade de países em desenvolvimento nos instiga a padronizar reagentes de menor custo levando aos objetivos do presente projeto que é a padronização do uso de corantes (tintas coloidais e isotiocianato de fluoresceína) para conjugação aos anticorpos monoclonais anti- intimina, -ST, -LT e -Stx