Desenvolvimento e aplicacao de um ensaio para isolamento de enterovirus pela tecnica de "shell vial".

• Processo: 00/02558-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2000
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2000
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Eurico de Arruda Neto
• Beneficiário: Rodrigo Ivo Marques dos Santos
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 95/09692-2 - Meningites por enterovírus: estudos de patogênese, imunidade e prevalência em Ribeirão Preto, AP.JP
• Assunto(s): Enterovirus Isolamento viral
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Echovirus | Enterovirus | Isolamento Viral | Piconarvirus | Shell Vial

Resumo

O presente projeto visa desenvolver um ensaio para isolamento de enterovírus pela técnica de "shell vial" e compará-lo com RT-PCR e isolamento em cultura convencional de células. Os métodos atualmente disponíveis para isolamento de enterovírus são trabalhosos, requerendo o uso de combinações de culturas de células de diferentes linhagens e inoculação em camundongos lactentes para atingir níveis satisfatórios de sensibilidade. A técnica de RT-PCR é muito sensível e tem aplicabilidade prática para diagnosticar essas infecções. Todavia, quando é importante obter-se isolados de enterovírus viáveis para estudo de caracterização fenotípica e genotípica, a técnica de RT-PCR sozinha é limitada. Além disso, a técnica de "shell vial" reduz o tempo necessário e a sensibilidade da detecção de vírus quando comparada com isolamento em monocamadas de células por desenvolvimento de efeito citopático. Portanto, é possível supor que a técnica de "shell vial" poderá aumentar as chances de obtermos isolados de enterovírus a partir de amostras clínicas para análise fenotípica e genotípica. Utilizaremos estoques pré-titulados de exemplares de vírus coxsackie A e B, echovírus e enterovírus numerados (68-71) para desenvolver o método, compará-lo-emos com RT-PCR e isolamento convencional e, posteriormente, aplicaremos o ensaio a amostras clínicas de pacientes com suspeita de infecção por enterovírus. (AU)