Caracterizacao enzimatica, funcional e estrutural de uma fosfolipase a2 acida isolada do veneno de bothrops moojeni.

• Processo: 03/01877-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2003
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
• Pesquisador responsável: Andreimar Martins Soares
• Beneficiário: Lucas Blundi Silveira
• Instituição Sede: Centro de Saúde. Universidade de Ribeirão Preto (UNAERP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 01/07486-9 - Toxinas e anti-toxinas naturais: isolamento, caracterização bioquímica funcional e estrutural, AP.JP
• Assunto(s): Ensaios enzimáticos Serpentes Bothrops moojeni DNA complementar Fosfolipases A2
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bioensaios Farmacologicos | Bothrops Moojeni | Cdna | Ensaios Enzimaticos | Fosfolipases A2 | Serpente

Resumo

O presente trabalho propõe a caracterização enzimática, funcional e estrutural de uma fosfolipaseA2 ácida do veneno de serpente Bothrops moojeni. Abordando os seguintes aspectos: isolamento em duas etapas, por cromatografia de troca iônica e RP-HPLC, caracterização bioquímica (peso molecular e ponto isoelétrico), enzimática (efeitos dose, temperatura e pH dependentes), funcional (atividade, fosfolipásica, anticoagulante, edematogênica, toxicidade e microbicida) e estrutural (seqüência completa do cDNA e análise da estrutura primária). Estudos adicionais de modificação química do resíduo de His48, altamente conservado na grande maioria destas enzimas, e a dependência ou não de íons Ca++, poderão trazer informações complementares sobre o mecanismo de ação desta PLA2 ácida de B. moojeni. Através destes estudos funcionais e da análise estrutural desta PLA2 ácida, poderá se obter maiores informações sobre os fatores que determinam a toxicidade destas enzimas, uma vez que, aparentemente está ausente nas fosfolipases A2 ácidas e presentes nas básicas. Visando, desta forma, obter dados complementares sobre as características responsáveis pelas atividades farmacológicas e tóxicas, e o melhor entendimento da participação ou não das PLA2 ácidas no envenenamento ofídico causado por esta serpente. (AU)