Perfil da atividade tirosina fosfatase de baixa massa molecular (PTP-BMr) em diferentes estágios de crescimento de culturas de osteoblastos

• Processo: 06/04620-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2006
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2007
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Pesquisador responsável: Pietro Ciancaglini
• Beneficiário: Ricardo Melo Neves
• Instituição Sede: Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto (FFCLRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Cinética enzimática Biomineralização Fosfatase ácida Proteínas tirosina fosfatases Fosforilação Osteoblastos Técnicas in vitro
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biomineralizacao | Cinetica Enzimatica | Cultura De Osteoblastos | Fosfatase Acida | Mecanismo Cinetico | Tirosina Fosfatase | Caracterização Cinética

Resumo

Eventos como fosforilação e desfosforilação de resíduos de tirosina em proteínas têm-se mostrado decisivos na regulação da divisão, diferenciação e desenvolvimento celular. A despeito do atual conhecimento estrutural e cinético das Proteínas Tirosina Fosfatases de baixo peso molecular (PTPs-BMr), e da sua importância ser inequívoca, poucos sistemas celulares controlados (in vitro) foram utilizados a fim de avaliar o papel fisiológico desta classe de PTPs. Osteoblastos são células capazes de produzir e mineralizar uma matriz orgânica constituída primordialmente por colágeno tipo I (95%), fatores de crescimento e outras proteínas não colágenas. Estas células apresentam fase proliferativa e de diferenciação marcantes, constituindo-se em um modelo interessante para se estudar o perfil da PTP-BMr durante a osteogênese, uma vez que esta classe de enzimas está associada ao controle da proliferação e diferenciação celular. A interação de osteoblastos com diferentes superfícies tem sido reconhecida como um evento chave na ativação/desativação de diversos genes. Assim, o objetivo deste trabalho é determinar in vitro o perfil de expressão e atividade da PTP-BMr em cultura primária de osteoblastos. A hipótese positiva deste estudo é que ocorra a modulação da atividade PTP-BMr frente às diferentes estágios de desenvolvimento celular e de mineralização. Este projeto será desenvolvido em colaboração com o grupo de pesquisa vinculado ao Temático FAPESP (03/09767-0, em andamento) Coordenado pelo Prof. Dr. Adalberto Luiz Rosa da FORP e com a colaboração do Prof. Dr. José Mauro Granjeiro da Universidade Federal Fluminense.