Expressao heterologa e caracterizacao molecular da tcrho1: um homologo da familia rho de trypanosoma cruzi.

• Processo: 02/03916-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2002
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Otavio Henrique Thiemann
• Beneficiário: Alécio Antonio Pimenta Junior
• Instituição Sede: Instituto de Física de São Carlos (IFSC). Universidade de São Paulo (USP). São Carlos , SP, Brasil
• Assunto(s): Trypanosoma cruzi GTP fosfo-hidrolases Cristalografia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cristalografia | Gtpases | Rho | Trypanosoma Cruzi

Resumo

As GTPases das quais a Rho faz parte, compõe uma família de proteínas de grande importância na regulação de diversos mecanismos celulares. A principal função atribuída a essa família de proteínas é a transdução de sinal em diversas vias, envolvidas com a morfologia celular, progressão através do ciclo celular e ativação de transcrição. A recente identificação de um homólogo das proteínas Rho em Trypanosoma cruzi abre a possibilidade do estudo molecular das vias de sinalização e transdução de sinal nesse protozoário parasito. Este projeto é parte de uma colaboração com o Prof. Dr. Ulisses Gazos Lopes (IBCCF-UFRJ) para a caracterização estrutural da Rho de T. cruzi (TcRhol). A seqüência da TcRhol foi caracterizada no IBCCF-UFRJ e um clone contendo a fase aberta de leitura enviado para nós. Esse clone foi novamente caracterizado e o gene subclonado em diversos vetores de expressão. Um protocolo de expressão foi estabelecido e a purificação da enzima TcRhol foi obtida. Neste projeto, pretende-se dar continuidade ao trabalho já iniciado com a caracterização molecular da enzima TcRhol e o rastreamento de condições de cristalização objetivando a obtenção de monocristais. Tais monocristais, caso obtidos, servirão para resolver a estrutura 3D a nível atômico da enzima TcRhol. Este projeto tem o potencial de gerar uma importante contribuição para o conhecimento dessa família de proteínas assim como avançar o treinamento do candidato Alécio A. P. Junior. (AU)