Estudos de genomica funcional e estrutural no fitopageno xanthomonas "xanthomonas axonopodis pv. citri".

• Processo: 01/00286-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2001
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2002
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica
• Pesquisador responsável: Carlos Henrique Inacio Ramos
• Beneficiário: Tulio Marcos Santos
• Instituição Sede: Associação Brasileira de Tecnologia de Luz Síncrotron (ABTLuS). Ministério da Ciência, Tecnologia e Inovação (Brasil). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Proteoma Duplo-híbrido
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Duplo-Hibrido | Proteinas De Virulencia | Proteoma

Resumo

O propósito principal desse projeto de pós-doutoramento é identificar, pelo sistema de duplo-híbrido em levedura, interações que ocorram entre chaperones da via de secreção tipo III, proteínas de virulência e proteínas do complexo de secreção tipo III da bactéria Xanthomonas axonopodis pv. citri. ORFs de genes que codificam as proteínas serão selecionadas in silico a partir dos clones "shotgun" utilizados para sequenciar o genoma desse patógeno de cítricos. Bibliotecas de duplo-híbrido serão geradas a partir das ORFs selecionadas. Bibliotecas randômicas serão preparadas a partir de DNA genômico nebulizado de X. a. pv. citri para que possamos identificar interações que ocorram entre outras proteínas. A seleção das interações será feita a partir de cruzamentos entre as diferentes bibliotecas. Estudaremos também a expressão de proteínas relacionadas à patogenicidade e virulência, induzida pelo crescimento de X. a. pv. citri em condições e meios de cultura adequados, através da separação das proteínas totais do patógeno por eletroforese bidimensional. No decorrer do projeto daremos início à caracterização estrutural e funcional das proteínas identificadas pelo duplo-híbrido e eletroforese bidimensional que se mostrarem mais importantes para a compreensão dos mecanismos de patogenicidade e virulência de Xanthomonas. (AU)