Estudo do antigeno nuclear de proliferacao celular (pcna) e citoqueratina 18 em placentas de vacas gestantes de embrioes clonados.

• Processo: 08/50228-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2008
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2010
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Zootecnia - Produção Animal
• Pesquisador responsável: Claudia Maria Bertan Membrive
• Beneficiário: Fernanda Cavallari de Castro
• Instituição Sede: Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus Experimental de Dracena. Dracena , SP, Brasil
• Assunto(s): Placenta Antígeno nuclear de célula em proliferação Células clonais Apoptose Proliferação celular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Apoptose | Citoqueratina 18 | Clone | Pcna | Placenta | Proliferacao Celular

Resumo

Aproximadamente 82% dos bovinos clonados por transferência nuclear não sobrevivem entre o 30ª e 90ª dias de prenhez. Tal evento resulta da redução na taxa de implantação e do aumento na taxa de mortalidade fetal, possivelmente em razão da expressão errônea de genes necessários para sustentar o desenvolvimento normal. As perdas gestacionais foram relacionadas a um corioalantóide rudimentar e alterações nos fatores que promovem o crescimento placentário e vascular. Considerando a importância de algumas proteínas específicas na apoptose e na proliferação celular, o presente projeto tem como objetivo geral fazer um estudo comparativo de algumas que possivelmente estejam envolvidas em tal evento. O estudo de tais proteínas será realizado mediante um modelo inédito com as células fetais expressando a proteína fluorescente verde (GFP). A utilização da proteína fluorescente verde (GFP) como marcador de células de origem fetal nas placentas de clones bovinos servirá de modelo inédito para estudo da Interação materno-fetal, visto que possibilitará um mapeamento diferenciando as células fetais e maternas. Com o auxílio deste modelo, pretende-se verificar o transporte de substâncias entre a mãe e o feto. Para tanto, utilizaremos 08 úteros gestantes provenientes de bovinos clonados, 08 de bovinos de fertilização in vitro (FIV) e 30 bovinos de inseminação artificial (IA) ou monta natural com idade até 90 dias de gestação, os quais terão seu desenvolvimento interrompido mediante abate humanitário das receptoras e recuperação do útero gestante. Serão coletadas as membranas fetais (âmnio, alantóide e cório), placentônios, carúnculas e áreas intercarunculares. Pelo emprego da técnica de Western Blotting, serão avaliadas as proteínas PCNA (Antígeno Nuclear de Proliferação Celular) e citoqueratina 18. A hipótese do presente estudo é que tais proteínas, envolvidas na apoptose e na proliferação celular, estarão presentes em menor quantidade nos materiais provenientes das gestações obtidas a partir dos clones. (AU)