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Hidrolases e monooxigenases - triagem de alto desempenho e RMN aplicada a interações supramoleculares entre enzima-ligante

Processo: 07/50855-1
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Vigência (Início): 01 de maio de 2007
Vigência (Término): 30 de abril de 2009
Área do conhecimento:Ciências Exatas e da Terra - Química
Pesquisador responsável:Anita Jocelyne Marsaioli
Beneficiário:Cintia Duarte de Freitas Milagre
Instituição-sede: Instituto de Química (IQ). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
Assunto(s):Metagenoma   Atividade enzimática   Ressonância magnética nuclear

Resumo

O Brasil apresenta ampla biodiversidade de microrganismos potencialmente ricos em novas enzimas. O longo tempo dedicado em triagens biocatalíticas, geralmente dispendiosas, não consegue acompanhar as necessidades atuais. Neste contexto, pretendemos implementar metodologias de triagens rápidas e mais abrangentes (triagens facilitadas) que as até então estudadas (triagens randômicas) empregando células íntegras de microrganismos e coleção de clones originados de estudos metagenômicos utilizando sondas fluorogênicas e UV-VIS como deteriores e, validar os resultados obtidos nestes ensaios por comparação com os resultados de triagens randômicas e biocatálise convencional. Além disso, dada a grande importância sobre o entendimento das interações entre moléculas pequenas (cofatores ou inibidores) e enzimas que participam de processos celulares específicos, pretendemos empregar a espectrometria de ressonância magnética nuclear (RMN) utilizando a técnica STD (Saturation Transfer Difference) para determinação do epitopo de enzimas isoladas obtidas comercialmente frente a diferentes substratos e condições reacionais. (AU)