Utilizacao do metodo de monocamadas auto organizadas para a construcao de biossensores.

• Processo: 02/01032-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2002
• Data de Término da vigência: 21 de outubro de 2002
• Área de conhecimento: Ciências Exatas e da Terra - Química - Química Analítica
• Pesquisador responsável: Lauro Tatsuo Kubota
• Beneficiário: Christiana Andrade Pessoa
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Técnicas biossensoriais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biossensor | Eletrodo De Ouro | Monocamadas Auto Organizadas | Salicilato | Salicilato Hidroxilase

Resumo

O presente projeto tem por finalidade o desenvolvimento de um biossensor para determinação de salicilato através da imobilização da enzima salicilato hidroxilase (SH) juntamente com o mediador PQQ (pirroloquinolinaquinona) sobre eletrodo de ouro utilizando-se o método de monocamada auto organizada . Este método permite a obtenção de uma monocamada de enzima altamente ordenada sobre a superfície do eletrodo, com uma alta estabilidade e reprodutibilidade, características de grande importância na construção de biossensores. Para tanto, inicialmente uma monocamada auto organizada de cisteamina será formada sobre o eletrodo de ouro e a partir desta, o mediador PQQ será covalentemente imobilizado utilizando-se carbodiimida. Uma vez realizada a imobilização do mediador, a imobilização da enzima poderá ser realizada segundo dois métodos: imobilização da enzima diretamente sobre o PQQ utilizando-se carbodiimida e através de um derivado do NADH, o N6-2-aminoetil-NADH e posterior imobilização da enzima através da ligação cruzada com glutaraldeído. Posteriormente será então estudado qual o método mais viável de imobilização tanto da enzima quanto do mediador, isto é o que fornecer a melhor estabilidade e sensibilidade ao biossensor. Finalmente, verificar a aplicabilidade do biossensor em amostras de fármacos e fluidos biológicos. (AU)