Clonagem, isolamento e analise do polimorfismo dos genes da proteina 2 da superficie de amastigotas obtidos do cdna de forma intra-celulares de diferentes cepas das linhagens 1 e 2 de ...

• Processo: 02/13186-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2003
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2003
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia - Protozoologia de Parasitos
• Pesquisador responsável: Maurício Martins Rodrigues
• Beneficiário: Carla Claser
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Antígenos de superfície Polimorfismo genético Trypanosoma cruzi
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Antigenos De Superficie | Polimorfismo | T.Cruzi

Resumo

Apesar das diversas evidências de que a proteína ASP-2 é extremamente importante do ponto de vista imunológico, estudos sobre seu polimorfismo genético são relativamente escassos até o momento. Com o intuito de aumentar os conhecimentos sobre este grupo de proteínas, pretendemos neste projeto estudar alguns aspectos relacionados com a diversidade genética observada nas diferentes cepas de T. cruzi. A clonagem e seqüenciamento do cDNA deste grupo de proteínas permitirão: i) a determinação das regiões negativamente selecionadas (conservadas); ii) a determinação das regiões positivamente selecionadas (variáveis); iii) comparação pela primeira vez de seqüências expressas em amastigotas das duas linhagens filogeneticamente distintas de T. cruzi. Objetivos específicos: A) Isolamento do RNA de amastigotas intra-celulares de T. cruzi das cepas das linhagens 1 (CL) e 2 (Tulahuen, G e Dm28, Briones et al., 1999.); 6) Geração do cDNA amplificação por PCR usando oligonucleotideos específicos para os genes de asp-2; C) Clonagem e seqüenciamento dos produtos de PCR; D) Análise do polimorfismo e identificação de AA positivamente selecionados através de um teste hierárquico de modelos de máxima verossimilhança. (AU)