Estudo comparativo de diferentes sistemas de inducao de expressao genica in vivo carregados em salmonella typhimurium vacinal.

• Processo: 05/58763-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2006
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2006
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica
• Pesquisador responsável: Elizabeth Angelica Leme Martins
• Beneficiário: Anna Paula Sheppard Guembes
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Proteínas recombinantes
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Promotores De Expressao | Proteina Recombinante | Salmonela

Resumo

O uso de bactérias atenuadas para a expressão de proteínas in vivo como vacina, apresenta a vantagem da imunização direta, sem necessidade de purificar e renaturar a proteína, que são processos caros e trabalhosos. Além disso, a bactéria pode funcionar como adjuvante e aumentar a resposta imune do organismo. Existem muitos dados sobre a utilização de promotores de expressão gênica ativados in vivo. Os estudos com esses promotores sempre incluem a comparação com promotores de expressão constitutiva, como lac, induzidos por IPTG. Vários estudos descritos na literatura demonstram as características do regulon soxRS, do promotor nirB, e do promotor de eucarioto de citomegalovirus CMV. Salmonelas com patogenicidade atenuada serão utilizadas para carregar o gene da proteína da fração C da toxina tetânica que confere imunidade à esta, juntamente com os diferentes promotores a serem estudados. Assim, este trabalho tem como objetivo estudar os sistemas controladores de expressão gênica soxRpsoxS, promotor nirB, promotor CMV e T7, nos vetores pAEsox, pAEnir, pCDNA e pAE, veiculando o gene do domínio C (FC) da toxina tetânica em salmonela, como diferentes formas de apresentação de antígenos, analisando-se as respostas imunes humoral, celulares e também a atividade adjuvante da bactéria e avaliando-se a possibilidade de desenvolvimento de vacinas múltiplas. (AU)