Papel dos genes tranportadores mdr3 e mdr4 na resistencia ao itraconazol em aspergillus fumigatus.

• Processo: 05/00137-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2005
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2005
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética
• Pesquisador responsável: Gustavo Henrique Goldman
• Beneficiário: Paula Fagundes de Gouvêa Bizzi
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 02/08711-9 - Caracterização molecular de genes envolvidos no processo de patogenicidade/virulência no fungo patogênico humano Paracoccidioides brasiliensis, AP.TEM
• Assunto(s): Aspergillus fumigatus Itraconazol
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Aspergillus Fumigatus | Itraconazol | Mdr3 | Mdr4 | Genética Molecular e de Microorganismos

Resumo

Aspergillus fumigatus é a espécie mais comum de Aspergillus que causa doença pulmonar com riscos à vida em pacientes imunocomprometidos. O tratamento destes pacientes tem sido limitado, em grande parte, à terapia com anfotericina B, equinocandina caspofungina e triazóis de amplo espectro, como itraconazol e voriconazol. Apesar da segurança e bom desempenho terapêutico dos triazóis, o uso contínuo pode resultar no desenvolvimento de resistência dos fungos a estas drogas. Os azóis inibem a enzima 14alfa-demetilase, bloqueando a via de síntese do ergosterol. A resistência fúngica aos azóis pode envolver tanto mudanças nos aminoácidos no sítio alvo da enzima, alterando a interação droga-alvo, quanto no acúmulo de droga, diminuindo a quantidade intracelular de droga. A redução do acúmulo de droga intracelular tem sido associada a superexpressão dos genes transportadores ABC (ATP-Binding Cassete) e MFS (Major Facilitator Superfamily). O presente projeto tem como objetivo deletar os genes transportadores mdr3 (deltamdr3), mdr4 (deltamdr4) ou mdr3-mdr4 (duplo mutante deltamdr3-mdr4), em Aspergillus fumigatus, visando verificar o papel destes na resistência a droga antifúngica, itraconazol. A susceptibilidade dessas três cepas mutantes ao itraconazol serão comparadas com a cepa selvagem (CEA17) avaliando-se as Concentrações Inibitórias Mínimas (MICs) para o itraconazol. Estes genes serão deletados utilizando-se a técnica de deleção gênica mediada por PCR.