Aspectos comparativos sobre a relacao entre cinetica, afinidade pelos substratos e espectros de bioluminescencia em luciferases ph-sensitivas e ph-insensitivas.

• Processo: 04/10492-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2004
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2005
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Pesquisador responsável: Vadim Viviani
• Beneficiário: Tassia Liberato Oehlmeyer
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Rio Claro. Rio Claro , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 00/05467-4 - Bioluminescência, estrutura e funções de luciferases de insetos e sistemas afins, AP.JP
• Assunto(s): Bioluminescência Cinética Luciferases Phengodidae
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bioluminescencia | Cinetica | Elateridade | Lempyridae | Luciferases | Phengodidae

Resumo

As luciferases são as enzimas que catalisam a reação da bioluminescência. As luciferases dos coleópteros estão divididas em dois grupos funcionais de acordo com a sensibilidade espectral ao pH: (I) pH-sensitivas, que são as luciferases dos lampirídeos e sofrem deslocamento batocrômico mediante a abaixamento do pH, altas temperaturas, etc, e (II) pH-insensitivas, que incluem as luciferases dos fengodídeos e elaterídeos e são insensíveis a estas condições. Estudos sobre propriedades físico-químicas de luciferases têm focalizado as luciferases dos lampirídeos (pH-sensitivas); pouco se sabe sobre as luciferases pH-insensitivas. Além disto, poucos estudos têm tentado investigar a relação entre as propriedades cinéticas das luciferases e os espectros de bioluminescência. Este trabalho tem como objetivo uma caracterização cinética e sua relação com os espectros de bioluminescência das luciferases pH-sensitivas e pH-insensitivas clonadas em nosso laboratório. Essa caracterização será feita através da análise da cinética enzimática das luciferases, medindo as constantes de decaimento da bioluminescência e os KMs para os substratos, verificando a influência de fatores como pH, temperatura, coenzima A e outros compostos sulfidrílicos, na alteração da cinética e espectros de bioluminescência. Assim, o propósito do trabalho é auxiliar a compreensão da relação entre estrutura e função dessas luciferases o que é essencial para a sua aplicação biotecnológica. (AU)