Imunolocalizacao e caracterizacao do transportador abc no pistilo de "nicotiana tabacum".

• Processo: 01/07762-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2001
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Maria Helena de Souza Goldman
• Beneficiário: Jeanne Blanco de Molfetta
• Instituição Sede: Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto (FFCLRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Estigma Pistilo
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Estigma | Imunofluorencencia | N.Tabacum | Pistilo | Transportador Abc

Resumo

Os transportadores ABC ("ATP-binding cassete") são proteínas que utilizam a energia proveniente da hidrólise do ATP no bombeamento do substrato através de uma membrana biológica, contra um gradiente de concentração (Higgins, 1992). Um gene que codifica um transportador ABC, denominado NtSAT1 (Nicotiana tabacum stigma ABC transporter) foi identificado e caracterizado parcialmente, sua expressão foi observada predominante na zona secretória do estigma (Processo FAPESP no. 95/0077-3). Neste projeto pretendemos: identificar em qual membrana celular das células da zona secretória do estigma se encontra este transportador através da técnica de imunofluorescência, purificar e caracterizar a proteína nativa. Com este intuito serão confeccionados vetores para expressão de domínios imunogênicos da região N-terminal da proteína e um peptídeo sintético, os quais serão utilizados para a produção de anticorpos em coelhos ou camundongos. Estes anticorpos serão utilizados em experimentos de imunofluorescência, na confecção de uma coluna de afinidade para a purificação da proteína nativa e em experimentos de imunoprecipitação. A partir destes dados será possível realizar estudos funcionais deste transportador e deste modo estabelecer sua contribuição no processo reprodutivo das plantas. (AU)