Utilização da imunohistoquímica para a marcação da migração celular em gestações de conceptos bovinos clonados que expressam a proteína fluorescente verde (gfp)

• Processo: 07/08010-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2007
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2008
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Flávia Thomaz Verechia Pereira
• Beneficiário: Rodrigo da Silva Nunes Barreto
• Instituição Sede: Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus Experimental de Dracena. Dracena , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 05/52676-1 - Expressão da proteína fluorescente verde (GFP) como marcador de células de origem fetal em gestações de clones bovinos, AP.JP
• Assunto(s): Movimento celular Proteínas de fluorescência verde Células clonais Biotecnologia Bovinos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: bovinos | Clones | conceptos | Gfp | migração celular | Biotecnologia

Resumo

A transferência nuclear é, atualmente, a técnica mais utilizada na clonagem de indivíduos adultos e jovens, porém a taxa de sucesso ainda é baixa e associada com alterações placentárias causadas por desregulação epigenética dos genes "imprinted" na embriogênese, devido à incompleta reprogramação nuclear. Para melhorar a eficiência da transferência nuclear, seriam requeridos métodos mais acurados para selecionar as células doadoras de núcleo e os embriões reconstruídos, para isto vem se usando a proteína fluorescente verde para selecionar embriões clonados transgênicos, que será utilizada neste trabalho para acompanhar, em bovinos, a migração das células gigantes trofoblásticas para o epitélio uterino. Associada a esse evento migratório temos glicoproteínas - integrinas relacionadas à adesão das células a matriz celular, motilidade e diferenciação celular - e componentes da matriz celular - colágeno IV - que serão mapeadas. Para tanto serão utilizados conceptos bovinos clonados transgênicos com expressão da proteína fluorescente verde, conceptos oriundos de fertilização in vitro e de monta natural/inseminação artificial, parte destas amostras já foram coletadas. Tais amostras serão preservadas e processadas de acordo com protocolos imunohistoquímicos específicos, serão fotodocumentadas e analisados em microscópio de luz de fluorescência e estatisticamente.