Desenvolvimento de linhagem industrial de Saccharomyces cerevisiae produtora de etanol combustível com atividade bactericida através da expressão de gene heterólogo

• Processo: 00/07521-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2000
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2002
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Agronomia
• Pesquisador responsável: Luiz Carlos Basso
• Beneficiário: Maria Evangelina de Camargo
• Instituição Sede: Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz (ESALQ). Universidade de São Paulo (USP). Piracicaba , SP, Brasil
• Assunto(s): Fermentação alcoólica Leveduras
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Atividade Bactericida | Fermentacao Alcoolica | Levedura Industrial | Pediocina Pa-1 | Transformacao De Leveduras

Resumo

A contaminação bacteriana, sério problema para a produção, industrial de etanol pela via fermentativa, exige elevados custos com o uso de antibióticos. A despeito dos ganhos tecnológicos do setor, apenas recentemente leveduras com capacidade de sobrevivência ao longo da safra foram selecionadas, destacando-se a linhagem PE-2, possibilitando a produção de substâncias com efeito bactericida durante a fermentação industrial. Porém, devido à ausência de marcas de auxotrofia, essas linhagens apresentam dificuldades na seleção de células recombinantes. Sendo assim, se propõe um sistema de transformação, composto por uma molécula de DNA fita dupla linear, contendo um cassete de expressão formado pelo gene pedA da bactéria láctea Pediododdus lactici, sob transcrição do promotor PGK, ladeado por seqüências do gene CAN1 de Saccharomyces cerevisiae, que se integra no gene CAN1 através de recombinação homóloga entre o gene e as extremidades do sistema de transformação, tornando a célula resistente à L-canavanina, sem necessitar de pressão seletiva, além de manter a informação adicional estável. Com isso a levedura de processo industrial, PE-2, passará a produzir PA-1 com atividade bactericida, diminuindo ou até dispensando o uso de antibióticos o que proporcionará vantagens técnicas e econômicas ao processo industrial. (AU)