Clonagem e caracterizacao do gene hscd (human small cytidine deaminase).

• Processo: 02/02031-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2002
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2002
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Sang Won Han
• Beneficiário: Bianca Cristina Garcia Lisboa
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Clonagem Técnicas de transferência de genes Citidina desaminase Apoptose
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Apoptose | Balb/Mk | Blasticidina S Desaminase | Citidina Desaminase | Clonagem | Transferencia Genica

Resumo

O gene bsrm codifica uma desaminase que atua especificamente sobre o antibiótico blasticidina S (BS), transformando-o em desamino-BS. Nós temos explorado o uso do sistema bsrm/BS para ser utilizado nos experimentos de transferência gênica, que é uma etapa fundamental para terapia gênica. Entretanto, ao expressar o gene bsrm nos queratinócitos nós observamos a morte dessas células em poucos dias. Até o momento, nós sabemos que a morte dos queratinócitos é provocada por fatores moleculares produzidos pelos queratinócitos murinos - BALB/MK - quando estes foram induzidos a morte por expressão do gene bsrm. A purificação e caracterização deste fator estão em andamento. Na tentativa de buscar um(ns) gene(s) que pudessem ter um papel semelhante ao gene bsrm nas células humanas e de camundongo, nós selecionamos alguns genes baseando da estrutura química do substrato BS. Entre os genes selecionados, nós temos iniciado a clonagem do gene hcd (human cytidine deaminase), baseando dos trabalhos já publicados anteriormente. Por surpresa nossa, durante o processo de clonagem do hcd nós encontramos uma forma alternativa deste gene, que aparentemente apresentou um tamanho menor. Este gene nós denominamos de hscd (human small cytidine deaminse). Neste projeto nós visamos clonar o gene hscd e analisar o efeito da sua expressão nas células BÁLB/MK. (AU)