Avaliacao de possiveis mecanismos envolvidos no remodelamento pulmonar induzidos por repetidas instilacoes de residuo da queima de oleo diesel (rofa) em camundongos c57bl/6

• Processo: 09/50192-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2009
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2010
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
• Pesquisador responsável: Carla Máximo Prado
• Beneficiário: Danilo Belchior Ponciano
• Instituição Sede: Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus Diadema. Diadema , SP, Brasil
• Assunto(s): Poluição atmosférica Modelo experimental Remodelamento pulmonar Estresse oxidativo Metaloproteinases
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Analise Histopatologica | Estresse Oxidativo | Metaloproteinases | Modelo Experimental | Poluicao Atmosferica | Remodelamento Pulmonar

Resumo

Elevados níveis de poluição urbana estão associados a doenças cardíacas e pulmonares (Saldiva et al., 2002; Medeiros Jr et al., 2004). Poucos estudos avaliaram os efeitos repetidos da exposição ao material particulado. Recentemente demonstramos que a instilação repetida de ROFA induziu Inflamação com presença de neutrófilos e macrófagos, remodelamento pulmonar e hiperresponsividade brônquica à metacolina em camundongos. Considerando que resultados semelhantes a estes são observados em humanos (Churg ET AL., 2003), julgamos de extrema importância elucidar os 7 mecanismos envolvidos nestas alterações, particularmente as de remodelamento da matriz extracelular. OBJETIVO: 1, Avaliar se as instilações repetidas de ROFA induzem alterações na expressão de fatores oxidantes e anti-oxidantes no pulmão; 2. Avaliar se as instilações repetidas de ROFA induzem alterações na expressão de fatores de crescimento (VGF e TGF-beta) e no equilíbrio metaloproteinase-inibidores no pulmão. METODOLOGIA: Serão utilizados cortes histológicos de camundongos C57BL6 que foram submetidos às instilações repetidas de ROFA (residual oil fly ash) por 5 dias, 15 dias ou que recebera salina. Será avaliada o volume epitelial de vias aéreas em coloração H&E com auxílio de microscópio óptico e técnica de contagem de pontos e retas. Os cortes serão submetidos a imunohistoquímica para detecção de: 1. actina para avaliação de músculo liso, 2. fatores de crescimento VEGF e TGF-beta, 3, metaloproteiriases e seus Inibidores, MMP-2, MMP-9, MMP12, TIMP-1 e TIMP-2, 4. marcadores de estresse oxidativo (GP91phox; nitrotirosina, GPX-1x, SOD-1 (superóxido dismutase), SOD-2 e arginase II. Todas estas colorações serão analisadas por análise de imagens e a análise estatística será realizada por meio do programa SigmaStat (Jandel Scientific, San Rafael, CA). (AU)