Processo apoptotico em linfocitos de ratos diabeticos: possivel papel dos acidos graxos.

• Processo: 01/06054-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2001
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2003
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia
• Pesquisador responsável: Rui Curi
• Beneficiário: Rosemari Otton
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 98/11714-2 - Lípides como mediadores das interações intercelulares, AP.TEM
• Assunto(s): Ácidos graxos Diabetes mellitus Glicose Apoptose Insulina
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Acidos Graxos | Apoptose | Diabetes | Glicose | Insulina | Linfoticos

Resumo

Neste projeto será realizada a avaliação da glicemia, insulinemia, cetonemia e do perfil lipídico no plasma de ratos diabéticos paralelamente à determinação do desencadeamento do processo apoptótico em linfócitos. Entre as avaliações apoptóticas faremos análise de fragmentação de DNA em citômetro de fluxo, gel de agarose, coloração com Hoescht 33324, externalização de fosfatidilserina e alteração no potencial transmembrana mitocondrial. As possíveis correlações entre os parâmetros plasmáticos e apoptose dos linfócitos serão estabelecidas. Após esta etapa faremos avaliações "in vitro" do agente disparador da apoptose em linfócitos controle. Este protocolo será realizado com a finalidade de demonstrar "in vitro" o efeito isolado do agente sobre o desencadeamento da apoptose em linfócitos. Depois de finalizada esta etapa, realizaremos a avaliação dos mecanismos envolvidos na apoptose de linfócitos. Como mecanismos será realizada a análise da atividade de caspase 3,6 e. 7, degradação de PARP, expressão de Fas e TNF-alfa, expressão da proteína 7A6 mitocondrial, expressão dos receptores de Fas e TNF. (AU)