Expressão de citocinas pró-inflamatórias por células amnióticas, coriônicas e deciduais de gestantes com Rotura Prematura de Membranas Pré-Termo.

• Processo: 09/18407-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2010
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2010
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Saúde Materno-infantil
• Pesquisador responsável: Márcia Guimarães da Silva
• Beneficiário: Nathalia Mayumi Noda Nicolau
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FMB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Citocinas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: citocinas | Membranas corioamnióticas | Rotura Prematura de Membranas | Imunologia aplicada a reprodução

Resumo

Introdução: A Rotura Prematura de membranas Pré-Termo (RPM-PT) é um dos principais problemas da Clínica Obstétrica, com etiologia relacionada à ascensão bacteriana do trato genital inferior para decídua e membranas corioamnióticas. Objetivos: Quantificar a expressão de RNAm de IL-1b, IL-6, IL-8 e TNF-a pelas células amnióticas, coriônicas e deciduais de gestantes com RPM-PT, na presença ou não de corioamnionite. Material e Métodos: Serão estudadas cerca de 20 pacientes com gestação única, cuja rotura de membranas ovulares tenha ocorrido espontaneamente entre 26ª e 36ª semanas de gestação e que estejam em trabalho de parto e cerca de 20 gestantes com RPM-PT fora do trabalho de parto, subdividas pela presença ou não de corioamnionite histológica. No momento da resolução da gestação, logo após a dequitação, serão retirados fragmentos de 1 cm2 da borda das membranas, que serão acondicionados em tubos tipo eppendorf contendo RNA laterTM para posterior realização da microdissecção a laser das células amnióticas, coriônicas e deciduais e quantificação de RNAm das citocinas inflamatórias produzidas por esses tipos celulares, por PCR em tempo real. Após esse procedimento, o restante das membranas será acondicionado em recipiente contendo formalina a 10%, por 24 horas para fixação. Fragmentos das membranas corioamnióticas serão desidratados em álcool, diafanizados em xilol e a seguir incluídos em blocos de parafina. Os blocos obtidos serão seccionados em micrótomo comum e as lâminas serão coradas pelo método clássico de Hematoxilina-Eosina (HE) para análise histopatológica das membranas. Os resultados da expressão de RNAm das citocinas inflamatórias serão submetidos a análise estatística empregando-se o software BioEstat 2.0. Para todos os testes utilizados será adotado o nível de significância de 5%.