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Quantificacao de canais de k+ atp sensiveis - romk - e suas isoformas (romk1, romk2 e romk3) em rim de rato.

Processo: 98/01112-5
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Data de Início da vigência: 01 de maio de 1998
Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2000
Área de conhecimento:Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
Pesquisador responsável:Mirian Aparecida Boim
Beneficiário:Denise Leite
Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):RNA mensageiro   Quantificação   Canais de potássio   Rim   Biologia molecular   Reação em cadeia por polimerase (PCR)
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Biologia Molecular | Canais De Potassio | Mrna | Pcr | Quantificacao | Rim

Resumo

O objetivo do projeto é quantificar a expressão de mRNAs de canais de K+ ATP-SENSÍVEIS (ROMK1, ROMK2 e ROMK3) em rim total de rato, bem como em túbulos isolados. Esta análise permitirá a avaliação da distribuição relativa de cada uma das isoformas do canal ROMK ao longo do néfron e correlacionar os dados obtidos com a fisiologia desses canais de K+. Possivelmente poderemos avaliar se ocorrem modificações nos níveis de expressão em patologias hereditárias (síndrome de Bartter) ou adquiridas (insuficiência renal aguda, crônica, diabetes, etc). Para tanto, estamos desenvolvendo um método de PCR competitivo no qual um fragmento de DNA heterólogo (competidor) de concentração inicial conhecida é usado com controle interno da reação de PCR. No momento, estamos realizando a construção do competidor e padronizando a técnica de PCR competitivo. (AU)

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