Acuracia diagnostica de um novo metodo para triagem da sindrome de turner por pcr em tempo real

• Processo: 08/58678-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2009
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2009
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
• Pesquisador responsável: Murilo Rezende Melo
• Beneficiário: Carla Sant´Anna Corrêa
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Médicas da Santa Casa de São Paulo (FCMSCSP). Fundação Arnaldo Vieira de Carvalho. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Diagnóstico precoce Síndrome de Turner Reação em cadeia da polimerase em tempo real
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Desempenho Analitico | Diagnostico Precoce | Pcr Em Tempo Real | Sindrome De Turner

Resumo

A síndrome de Turner (ST) é a anormalidade cromossômica mais comum em mulheres. Definida por expressões fenotípicas geradas pela perda parcial ou total de um dos cromossomos X, associada a mosaicismo celular. Em sua maioria, o gameta monossômico é herdado do pai, pela não disjunção do par XY. O genótipo mais comum é o 45,X, e estima-se prevalência de 1:2000 a 2500 meninas nascidas vivas. Por ser uma doença genética freqüente, existe interesse em sua detecção precoce para rápida intervenção clínica, visando a minimizar seus estigmas. É importante a investigação de outras malformações associadas. A triagem de casos suspeitos pode ser feita pela detecção da cromatina sexual em células epiteliais de mucosa bucal e, a confirmação diagnóstica, por meio do cariótipo, mediante cultura e isolamento de linfócitos ou células de outros tecidos. No entanto, esse método combinado apresenta baixa sensibilidade e especificidade, pouca automatização e custo elevado, havendo dificuldade em sua aplicação em larga escala, Uma possível solução é a utilização da técnica de Polimerase Chain Reaction (PCR) em tempo real. A técnica, na qual se utiliza um gene localizado no braço curto do X, ARSE e sua quantificação em relação a um gene autossômico, GAPDH. Dessa forma, a nova técnica desenvolvida apresentou sensibilidade e especificidade próxima de 100%, na etapa piloto de avaliação com amostras de 31 mulheres com ST 45, X e 63 mulheres normais (AUC, 1.0). Avaliaremos o desempenho analítico desta técnica, utilizando sangue obtido em papel de filtro de 380 indivíduos do sexo feminino, randomizados de maneira cega ao examinador. As amostras serão provenientes de 31 pacientes com ST 45,X; 29 pacientes com ST e outros cariótipos (não, 45,X); 200 controles femininos férteis e 120 meninas em investigação de baixa estatura, caracterizando um grupo com alto risco de apresentar ST. O DNA será extraído e avaliado por técnica de PCR em tempo-real padronizada no estudo piloto, utilizando o valor de corte igual ou superior a 0,7 para a caracterização de ausência de 45,X. Esse novo teste proposto é inédito na literatura e se caracteriza por ser prático, rápido e de baixo custo, tornando possível sua implantação na triagem da ST. (AU)