Interacoes nucleo-citoplasmaticas apos transplante de nucleo somatico em ocitos bovinos: um estudo sobre seus efeitos na morfologia nuclear sintese de dna e degradacao de mpf quinase.

• Processo: 98/12805-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 1999
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2000
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Cláudia Lima Verde Leal
• Beneficiário: Cláudia Lima Verde Leal
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Jaboticabal. Jaboticabal , SP, Brasil
• Assunto(s): Bovinos Ciclo celular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bovino | Ciclo Celular | Fibroblasto Fetal | Interacoes Nucleo-Citoplasma | Nucleo Somatico | Transplante De Nucleo

Resumo

A tecnologia de transplante de núcleo (TN) tem sido utilizada para, entre outras coisas, a obtenção de clones em diversas espécies domésticas, no entanto a eficiência desta técnica ainda é baixa apesar do grande número de pesquisas. Dentre os diversos fatores que interferem na eficiência do TN, um de vital importância é a sincronização da fase do ciclo celular entre o núcleo doador e o citoplasma receptor, para que possam interagir adequadamente possibilitando a reprogramação e remodelação do núcleo transplantado pelo citoplasma receptor, evitando danos ao DNA e desequilíbrios cromossômicos no embrião resultante, os quais levariam à redução das taxas de desenvolvimento dos mesmos. Recentemente, a possibilidade de clonar animais adultos demonstrada por WILMUT et al (1997) tem despertado grande interesse, sendo necessária para tanto, a utilização de células somáticas como doadoras de núcleo. No momento, não existem ainda trabalhos que envolvam o estudo de sincronização de ciclo celular, quando se utilizam tais células como doadoras de núcleo, sejam elas células somáticas fetais ou adultas. O objetivo do presente projeto é de estudar as interações núcleo-citoplasmáticas entre células somáticas fetais sincronizadas em diferentes fases do ciclo celular e oócitos receptores, na espécie bovina. Fibroblastos fetais (doadores de núcleo) terão o ciclo celular sincronizado nas fases G0, G1/S e M e cada tipo de célula será transplantado a oócitos em Metáfase II enucleados. Os embriões reconstituídos resultantes (G0+M; G1/S+M; M+M) serão então estudados, em diferentes momentos após a fusão das células, quanto à quebra da membrana nuclear e configuração da cromatina, retomada da síntese de DNA e degradação da quinase do fator promotor de maturação (MPF), avaliados por microscopia eletrônica de transmissão, incorporação de bromodeoxiuridina (BrDU) e ensaio de histona H1 quinase, respectivamente. (AU)