Expressao, purificacao e cristalizacao da proteina reguladora de ferro (iron regulatory protein i - irp1).

• Processo: 98/09956-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 1998
• Data de Término da vigência: 02 de janeiro de 2000
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Nilson Ivo Tonin Zanchin
• Beneficiário: Nilson Ivo Tonin Zanchin
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 95/09442-6 - Correlação entre homeostase de ferro e estresse oxidativo conseqüências para a produção de modificações oxidativas no DNA, AP.TEM
• Assunto(s): Expressão de proteínas Elementos estruturais de proteínas Cristalografia de proteínas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cristalizacao De Proteinas | Estrutura De Proteinas | Expressao De Proteinas | Proteina Reguladora De Ferro

Resumo

A proteína reguladora de ferro, IRP1 (iron regulatory protein 1), exerce controle pós-transcricional sobre a síntese de proteínas envolvidas na assimilação, armazenamento e utilização de ferro, as quais contêm estruturas denominadas IRE (iron responsive element) em seus mRNAs. IRP1 tem alta afinidade por IRE na forma apoproteíca, que pode ser revertida na presença de ferro, quando então, a IRP1 se dissocia do mRNA e, com a incorporação de um cluster ferro-enxofre (4Fe-4S), pode desempenhar a função de aconitase. A afinidade da IRP1 por IRE também pode ser ativada por agentes oxidantes como óxido nítrico e peróxido de hidrogênio. O conhecimento da estrutura da IRP1 nos diferentes estados é fundamental para se entender como a mesma controla a homeostase intracelular de ferro. Neste trabalho pretende-se purificar IRP1 recombinante em quantidade e com grau de pureza suficientes para a determinação de sua estrutura por cristalografia. (AU)