Avaliação dos efeitos da radiação gama na expressão de genes reguladores da recombinação V(D)J de receptores de células T (TCR V beta 8.1)

• Processo: 00/09994-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2000
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunogenética
• Pesquisador responsável: Geraldo Aleixo da Silva Passos Júnior
• Beneficiário: Renato Sousa Cardoso
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Recombinação V(D)J Expressão gênica Radiação gama Genes reguladores Linfócitos T
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Desenvolvimento Do Timo | Dna-Arrays | Expressao Genica | Linfocitos T | Receptores De Celulas T | Recombinacao V(D)J

Resumo

Neste projeto tentaremos atribuir novas funções a genes já conhecidos e descobrir "novos" genes envolvidos na recombinação V(D)J de receptores de células T (TCR VB8.1-DB2.1). Os genes cujas funções já estão associadas ao controle da recombinação V(D)J e que selecionamos para o estudo são RAG-1 e RAG-2, Ku70 e Ku86, DNA-PKcs, XRCC4, ILs e retrovírus MMTV (superantígeno). Procuraremos novos genes através da análise dos níveis de expressão de células T em desenvolvimento usando "DNA-arrays". Os ensaios serão com timos fetais murinos coletados no 14o dia de gestação e mantidos in vitro. Faremos extrações de DNA genômico e de RNA total em diferentes fases de cultivo do órgão. As amostras de DNA serão utilizadas nos ensaios de recombinação e de RNA na expressão gênica. O ensaio de recombinação V(D)J será entre TCR VB8.1 e DB2.1, pois estes segmentos se rearranjam em épocas diferentes da gestação entre linhagens murinas e durante o curso do desenvolvimento fetal apresentam padrões distintos de rearranjos. Com o intuito de modularmos a expressão dos genes acima indicados e dos vários outros apontados pelos "DNA-arrays", faremos uso dos raios gama de 60Co, irradiando os timos em cultura e avaliando os níveis de expressão gênica e a ocorrência de recombinação V(D)J. Os resultados fornecerão uma idéia mais clara sobre o controle dos rearranjos gênicos de TCR auxiliando a compreensão dos mecanismos que geram a diversidade dos linfócitos T. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

CARDOSO‚ R.S.; JUNTA‚ C.M.; MACEDO‚ C.; MAGALHÃES‚ D.A.R.; SILVEIRA‚ E.L.V.; PAULA‚ M.O.; MARQUES‚ M.; MELLO‚ S.S.; ZÁRATE-BLADÉS‚ C.R.; NGUYEN‚ C.; et al. Hybridization signatures of gamma-irradiated murine fetal thymus organ culture (FTOC) reveal modulation of genes associated with T-cell receptor V (D) J recombination and DNA repair. Molecular Immunology, v. 43, n. 5, p. 464-472, 2006. (99/12135-9, 00/09994-9)