A participação dos núcleos das células hospedeiras na invasão de células por patógenos intracelulares

• Processo: 02/00731-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2002
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2006
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Biologia e Fisiologia dos Microorganismos
• Pesquisador responsável: Michel Pinkus Rabinovitch
• Beneficiário: Vanessa Cristina Coimbra
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Leishmania
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Citoplastos | Enucleacao | L)L) Amazonensis | S.Flexneri

Resumo

A participação do núcleo das células hospedeiras no decorrer de sua invasão por patógenos não virais foi insuficientemente estudada. Trabalhos pouco reconhecidos demonstraram que fibroblastos, enucleados por centrifugação na presença de citocalasina, podem ser infectados por Toxoplasma gondii, Chlamydia trachomatis, C. psittaci ou Rickettsia prowasekii. Este projeto examina a infecção por Leishmania (L.) amazonensis ou por Shigella flexneri, de macrófagos e outras células enucleadas por centrifugação. A funcionalidade das células enucleadas (citoplastos), a localização intracelular, a viabilidade e a multiplicação dos patógenos serão estudadas em culturas vivas ou fixadas. A funcionalidade dos citoplastos será avaliada pela capacidade pinocítica e fagocítica, e pelo potencial de membrana mitocondrial, cálcio mitocondrial, cálcio citosólico, e pH citosólico, medidos por meio de sondas fluorescentes. Os vacúolos que abrigam L. (L.) amazonensis em células nucleadas e enucleadas serão comparados quanto aos marcadores de membrana, pH, e capacidade fusional. A movimentação actina-dependente de S. flexneri no citosol de células enucleadas e sua eventual liberação para o meio ou para células vizinhas serão estudadas por vídeo-microscopia e microscopia de fluorescência. (AU)