Recuperação e purificação de proteínas recombinantes com cauda de poli(histidina): filtração em membranas de afinidade com íons metálicos imobilizados

• Processo: 00/05723-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2000
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2004
• Área de conhecimento: Engenharias - Engenharia Química - Operações Industriais e Equipamentos para Engenharia Química
• Pesquisador responsável: Sonia Maria Alves Bueno
• Beneficiário: Luciana Cristina Lins de Aquino
• Instituição Sede: Faculdade de Engenharia Química (FEQ). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Cromatografia de afinidade Íons metálicos Proteínas recombinantes Purificação de proteínas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cromatogrfia De Afinidade | Filtracao | Histidina-Tag | Ions Metalicos Imobilizados | Membranas | Proteinas Recombinantes

Resumo

Este projeto de pesquisa visa investigar o potencial de utilização de membranas de afinidade com íons metálicos imobilizados para purificação de proteínas recombinantes com histidina-tag a partir de solução clarificada (filtrado da suspensão de células lisadas) e não clarificada (suspensão de células lisadas). Para estes estudos serão utilizadas duas proteínas recombinantes com histidina-tag de baixa massa molecular como modelo: pró-insulina humana e hormônio de crescimento suíno. Os aspectos abordados neste trabalho serão a preparação e caracterização de membranas de fibras ocas com o agente quelante IDA imobilizado, a avaliação da seletividade, capacidade e reprodutibilidade das membranas na adsorção das proteínas recombinantes a partir de soluções clarificadas ou não em função dos diferentes íons metálicos testados. Quando material lisado não clarificado for empregado, será avaliado a possibilidade da membrana de afinidade ser capaz de purificar a proteína-histidina-tag sem comprometer o rendimento e a pureza, em condições mínimas de colmatagem e queda do fluxo de permeado. O desempenho do método proposto em purificar proteínas recombinantes será comparado com outros métodos comumente utilizados para esse fim. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

AQUINO, Luciana Cristina Lins de. Purificação de pro-insulina humana recombinante com cauda de poli(histidina): cromatografia em membranas de afinidade com ions metalicos imobilizados. 2004. Tese de Doutorado - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Engenharia Química Campinas, SP.