Maturação nuclear e padrões de apoptose em oócitos bovinos na presença de células do cumulus em meio suplementado com diversas macromoléculas

• Processo: 02/11652-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2003
• Data de Término da vigência: 29 de fevereiro de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Gisele Zoccal Mingoti
• Beneficiário: Edson Guimarães Lo Turco
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia (FOA). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araçatuba. Araçatuba , SP, Brasil
• Assunto(s): Apoptose Morte celular programada Embrião Oócitos Maturação in vitro
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Apoptose | Embrioes | Oocitos

Resumo

A apoptose, também chamada de morte celular programada, é um processo inerente a todas as células, inclusive ao oócito durante o processo de maturação in vitro (MIV). Cerca de 10 a 20% dos oócitos selecionados para a maturação entram em apoptose e cerca de 20 a 40% dos zigotos colocados em cultivo não chegam a blastocisto devido ao mesmo processo. A ocorrência da apoptose depende de vários fatores, dentre os quais podemos citar o tipo de macromolécula utilizada como suplemento do meio de cultivo. Afim de se quantificar e analisar qual macromolécula adicionada ao meio de cultivo de maturação tem maior influência sobre a apoptose, os oócitos, as células do cumulus e os embriões produzidos in vitro (PIV), serão avaliados através de técnicas para detecção de quebra de fita simples e dupla de DNA. Os oócitos e embriões serão corados com hoescht 33342, para se avaliar a maturação nuclear nos oócitos e contagem de células nos embriões; essas análises serão feitas nos oócitos após 0, 8, 16, 24 horas do início do cultivo de maturação em meio suplementado com Soro Fetal Bovino (SFB), Albumina Sérica Bovina (BSA), Álcool Polivinilico (PVA), e nos embriões (mórulas/blastocistos) que serão cultivados em meio SOF com SFB. Ainda, será quantificada nos meios de maturação a concentração de estrógeno e progesterona produzidas pelas células do cumulus. Os experimentos serão repetidos no mínimo 10 vezes. (AU)